目的 观察小干扰RNA (siRNA)沉默P-21活化激酶1(PAK1)基因对肝癌细胞的增殖、凋亡及迁移和侵袭能力的影响及其分子机制.方法 设计合成针对PAK1的特异性siRNA(siPAK1)和通用无义siRNA序列,转染肝癌细胞,分为siPAK1组和NC组,通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术和Western blot法检测肝癌细胞中PAK1的表达;利用细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞仪、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验,分别检测其对肝癌细胞生物学特性的影响;利用Western blot检测肝癌细胞中磷酸化的细胞蛋白调节激酶1/2 (p-ERK1/2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)分子的蛋白表达量.结果 转染siPAK1能明显抑制肝癌细胞中PAK1的表达;沉默PAK1基因能明显减少肝癌细胞的增殖[NC组:Hep3B(100.00±0.00)%,SMMC-7721(100.00±0.00)%;siPAK1组:Hep3B(30.35±3.44)%,SMMC-7721(41.76±5.91)%(PHep3B=0.018,PSMMC-7721 =0.022)]、促进肝癌细胞凋亡(PHep3B=0.004,PSMMC-7721 =0.006)并且抑制其迁移(PHep3B=0.028,PSMMC-7721 =0.018)和侵袭(PHep3B=0.012,PSMMC-7721 =0.006)的能力;沉默PAK1基因可抑制肝癌细胞中p-ERK1/2、bcl-2和Cyclin D1分子的蛋白表达量.结论 沉默PAK1基因可通过PAK1/ERK通路促进肝癌细胞凋亡,
作者:蒋帅;胡少勃;程翔;柯文波;李潼;高杨;王立宇;李民;宋自芳;郑启昌
来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 12期