目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2)丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路在基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡中的作用.方法 将人正义、反义TIMP-1用脂质体法转染大鼠肾小球系膜细胞,并将细胞分为正常对照组、未转染组、空载体组、正义转染组和反义转染组.各组细胞分别用高糖(25 mmol/L)和(或)MEK(ERK1/2通路中的MAPK激酶)特异性抑制剂PD98059(50 μmol/L)刺激24 h.应用透射电镜观察细胞内部结构变化.Western印迹观察磷酸化(p)的ERK1/2、P90rsk、Bad及总的P90rsk、Bad、Bcl-2蛋白的表达.结果 加入PD98059后,各组细胞内可见凋亡小体形成、细胞皱缩、核固缩、染色体边集及膜泡样突变等现象,与未转染组比较,以反义转染组最明显,凋亡细胞数目最多;正义转染组细胞形态改变不十分明显,凋亡细胞数目相对较少.此外,加入PD98059后,ERK1/2、P90rsk、Bcl-2及Bad的磷酸化明显减少(P＜0.05),ERK1/2和P90rsk的磷酸化以正义转染组最明显(P＜0.01);总P90rsk、总Bad表达量在各组之间无显著差异.结论 ERK1/2通路在TIMP-1抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡过程中起重要作用.
作者：孙艳玲；林洪丽；吴泰华；王楠；谢华；刘越坚
来源：中华肾脏病杂志 2006 年 22卷 9期
