目的 探讨miR-363-3p靶向TWIST1调控非小细胞肺癌A549细胞迁移和侵袭的分子机制.方法 将体外培养的A549细胞分为空白对照组(细胞未做任何处理);模拟物对照组(转染miR-363-3p模拟物阴性对照);模拟物组(转染miR-363-3p模拟物);后期实验另设:模拟物+pcDNA组(转染miR-363-3p模拟物和pcDNA3.1空载体质粒);模拟物+TWIST1组(转染miR-363-3p模拟物和pcDNA3.1-TWIST1过表达质粒).采用RT-PCR检测细胞中miR-363-3p的表达,Western blot检测细胞中TWIST1蛋白和上皮间质转化(EMT)相关蛋白Vimentin、E-cadherin的表达,Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭.双荧光素酶报告基因实验检测miR-363-3p和TWIST1的靶向关系.两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 与空白对照组和模拟物对照组比较,模拟物组A549细胞中miR-363-3p表达水平(1.00±0.08、0.97±0.05比3.82±0.45)升高,TWIST1 mRNA(1.00±0.06、0.98±0.06比0.39±0.02)和蛋白的表达水平(0.81±0.05、0.78±0.06比0.42±0.02)降低,差异具有统计学意义(P均<0.05).与空白对照组和模拟物对照组比较,模拟物组A549细胞Vimentin蛋白表达水平(0.58±0.04、0.55±0.05比0.36±0.03)降低,E-cadherin蛋白的表达水平(0.22
作者:李月华;曹爽
来源:中华细胞与干细胞杂志(电子版) 2020 年 10卷 3期