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目的 探讨双酚A(bisphenol A,BPA)对小鼠胚胎干细胞(mESC)的毒性特征及OCT4、SOX2基因表达的影响.方法 分别以10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L浓度的BPA及二甲亚砜(溶剂对照组,DMSO)处理mESC系(S6)细胞24 h,重复处理3次,倒置显微镜下观察正常组、染毒组细胞的形态变化,CCK-8法检测BPA对细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC50);分别采用real-time (RT)-Q-PCR和western-blotting技术检测BPA作用下OCT4、SOX2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化.结果 BPA对mESC有一定的毒性作用,染毒浓度越大,细胞活性越小,二者呈剂量-效应关系,并通过计算得出BPA对mESC的IC50为4.3×10-4mol/L,同时结合BPA的环境相关暴露浓度和相关资料,最终取10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L系列浓度作为后续实验浓度;BPA处理24 h后,mESC细胞形态发生改变,较高浓度组与对照组比较,细胞数量明显减少,出现少许漂浮的细胞,克隆变得不规则,分化趋势明显.BPA浓度为10-7、10-6、10-5、10-4的OCT4mRNA相对表达量分别为1.146 ±0.087、1.156 ±0.030、1.158±0.103、1.374±0.053,均高于对照组(1.000±0.000)(t值分别为-2.384、-2.953、-3.203、-4.021,P值均<0.05);BPA染毒浓度为10-4 mol/L(1.113±0.052)的SOX2 mRNA相对表达水平高于对照组

作者:罗凌凤;杨淋清;吴德生;周明;龚春梅;刘庆成;夏菠;黄冠琴;匡侠锋

来源:中华预防医学杂志 2013 年 47卷 2期

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罗凌凤;杨淋清;吴德生;周明;龚春梅;刘庆成;夏菠;黄冠琴;匡侠锋
来源:
中华预防医学杂志 2013 年 47卷 2期
标签:
胚胎干细胞 小鼠 双酚A OCT4基因 SOX2基因 Embryonic stem cells Mice Bisphenol A OCT4 gene SOX2 gene
目的 探讨双酚A(bisphenol A,BPA)对小鼠胚胎干细胞(mESC)的毒性特征及OCT4、SOX2基因表达的影响.方法 分别以10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L浓度的BPA及二甲亚砜(溶剂对照组,DMSO)处理mESC系(S6)细胞24 h,重复处理3次,倒置显微镜下观察正常组、染毒组细胞的形态变化,CCK-8法检测BPA对细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC50);分别采用real-time (RT)-Q-PCR和western-blotting技术检测BPA作用下OCT4、SOX2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化.结果 BPA对mESC有一定的毒性作用,染毒浓度越大,细胞活性越小,二者呈剂量-效应关系,并通过计算得出BPA对mESC的IC50为4.3×10-4mol/L,同时结合BPA的环境相关暴露浓度和相关资料,最终取10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L系列浓度作为后续实验浓度;BPA处理24 h后,mESC细胞形态发生改变,较高浓度组与对照组比较,细胞数量明显减少,出现少许漂浮的细胞,克隆变得不规则,分化趋势明显.BPA浓度为10-7、10-6、10-5、10-4的OCT4mRNA相对表达量分别为1.146 ±0.087、1.156 ±0.030、1.158±0.103、1.374±0.053,均高于对照组(1.000±0.000)(t值分别为-2.384、-2.953、-3.203、-4.021,P值均<0.05);BPA染毒浓度为10-4 mol/L(1.113±0.052)的SOX2 mRNA相对表达水平高于对照组

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