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目的采用表位重建技术,对预测MAGE-n抗原HLA-A2限制性CTL表位结合活性进行研究.方法用SYFPEITHI超基序法远程预测系统和量化基序多项式法结合的预测方法,筛选新的MAGE-n抗原HLA-A2限制性CTL表位作为候选表位.对预测的抗原表位进行多肽合成,并用HPLC进行纯化,质谱法(MS)鉴定.候选表位与HLA-A2位点的亲和力及结合稳定性用竞争结合抑制实验、T2结合稳定性实验及MHC-肽复合体稳定性实验测定.结果用表位预测法筛选MAGE-n抗原5个HLA-A2限制性CTL表位为候选表位.QLVFGIEVV(159-167)、IMPKTGFLI(195-203)和FLIIVLVMI(201-209)3个表位具有较高的HLA-A2结合力(IC50<15 μM)和结合稳定性(DT50>6 h),可作为MAGE-n抗原HLA-A2限制性CTL候选表位进行进一步研究.结论表位预测结合表位重建方法可提高肿瘤抗原CTL表位研究的效率.MAGE-n抗原HLA-A2限制性CTL表位经免疫学鉴定后,可望用于新型肝癌治疗性多肽疫苗的设计研究,为临床肝癌特异性治疗奠定基础.

作者:董海龙;隋延仿;叶菁;李增山;曲萍;张秀敏;陈广生;禄韶英

来源:中华医学杂志 2003 年 83卷 12期

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作者:
董海龙;隋延仿;叶菁;李增山;曲萍;张秀敏;陈广生;禄韶英
来源:
中华医学杂志 2003 年 83卷 12期
标签:
肿瘤抗原 癌,肝细胞 表位,T淋巴细胞
目的采用表位重建技术,对预测MAGE-n抗原HLA-A2限制性CTL表位结合活性进行研究.方法用SYFPEITHI超基序法远程预测系统和量化基序多项式法结合的预测方法,筛选新的MAGE-n抗原HLA-A2限制性CTL表位作为候选表位.对预测的抗原表位进行多肽合成,并用HPLC进行纯化,质谱法(MS)鉴定.候选表位与HLA-A2位点的亲和力及结合稳定性用竞争结合抑制实验、T2结合稳定性实验及MHC-肽复合体稳定性实验测定.结果用表位预测法筛选MAGE-n抗原5个HLA-A2限制性CTL表位为候选表位.QLVFGIEVV(159-167)、IMPKTGFLI(195-203)和FLIIVLVMI(201-209)3个表位具有较高的HLA-A2结合力(IC50<15 μM)和结合稳定性(DT50>6 h),可作为MAGE-n抗原HLA-A2限制性CTL候选表位进行进一步研究.结论表位预测结合表位重建方法可提高肿瘤抗原CTL表位研究的效率.MAGE-n抗原HLA-A2限制性CTL表位经免疫学鉴定后,可望用于新型肝癌治疗性多肽疫苗的设计研究,为临床肝癌特异性治疗奠定基础.

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