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目的 探讨干扰素α(IFN-α)调控肝癌细胞SMMC-7721胸苷磷酸化酶(TP)表达的机制.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SMMC-7721细胞中TP mRNA的表达水平;应用JAK-STAT信号通路阻断剂AG-490研究该通路的作用;应用基因转录抑制剂放线菌素D研究TP mRNA的半衰期.结果 IFN-α上调TP mRNA表达具有时间-剂量依赖性.10000U/rrd的IFN-α处理SMMC-7721细胞8h后,TP mRNA表达水平开始升高,至12h时峰值达0.7272±0.0582,此后维持在0.6573±0.1873水平至72h.5000U/ml和10000U/ml的IFN-α处理肝癌细胞24h,TP mRNA表达水平分别为0.5991±0.2179和0.6298±0.1786,与未用IFN-α处理的肝癌细胞(0.2231±0.0595)相比,差异有统计学意义(P<0.05).应用AG-490阻断JAK-STAT通路,IFN-α上调TP mRNA表达的能力明显受到抑制(0.2545±0.1053),与未处理的肝癌细胞(0.2329±0.1032)相比,差异不明显,仅应用IFN-α而未应用AG-490处理的肝癌细胞,其TP mRNA表达水平则显著升高(0.7209±0.1168).应用IFN-α处理SMMC-7721细胞24h后,利用放线菌素D阻断RNA聚合酶,TP mRNA半衰期为35.8h,而未用IFN-α处理的肝癌细胞为8.5h.结论 一定剂量的IFN-α上调TP mRNA的表达水平,与细胞内JAK-STAT信号通路有关;IFN-α具有转录后稳定TP mRNA的作用.

作者:肖永胜;周俭;樊嘉;孙绮蛮;赵燕;孙瑞霞;刘银坤;汤钊猷

来源:中华肿瘤杂志 2008 年 30卷 6期

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作者:
肖永胜;周俭;樊嘉;孙绮蛮;赵燕;孙瑞霞;刘银坤;汤钊猷
来源:
中华肿瘤杂志 2008 年 30卷 6期
标签:
胸苷磷酸化酶 干扰素α JAK-STAT信号通路 癌,肝细胞 Thymidine phosphorylase Interferon-alpha JAK-STAT signal transduction Carcinoma hepatocellular
目的 探讨干扰素α(IFN-α)调控肝癌细胞SMMC-7721胸苷磷酸化酶(TP)表达的机制.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SMMC-7721细胞中TP mRNA的表达水平;应用JAK-STAT信号通路阻断剂AG-490研究该通路的作用;应用基因转录抑制剂放线菌素D研究TP mRNA的半衰期.结果 IFN-α上调TP mRNA表达具有时间-剂量依赖性.10000U/rrd的IFN-α处理SMMC-7721细胞8h后,TP mRNA表达水平开始升高,至12h时峰值达0.7272±0.0582,此后维持在0.6573±0.1873水平至72h.5000U/ml和10000U/ml的IFN-α处理肝癌细胞24h,TP mRNA表达水平分别为0.5991±0.2179和0.6298±0.1786,与未用IFN-α处理的肝癌细胞(0.2231±0.0595)相比,差异有统计学意义(P<0.05).应用AG-490阻断JAK-STAT通路,IFN-α上调TP mRNA表达的能力明显受到抑制(0.2545±0.1053),与未处理的肝癌细胞(0.2329±0.1032)相比,差异不明显,仅应用IFN-α而未应用AG-490处理的肝癌细胞,其TP mRNA表达水平则显著升高(0.7209±0.1168).应用IFN-α处理SMMC-7721细胞24h后,利用放线菌素D阻断RNA聚合酶,TP mRNA半衰期为35.8h,而未用IFN-α处理的肝癌细胞为8.5h.结论 一定剂量的IFN-α上调TP mRNA的表达水平,与细胞内JAK-STAT信号通路有关;IFN-α具有转录后稳定TP mRNA的作用.

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