目的 研究miR-15a和miR-16靶向调控bcl-2的表达对结肠癌细胞耐药性的逆转作用.方法 将miR-15a和miR-16模拟物或抑制物转染结肠癌长春新碱(VCR)敏感细胞株HCT8或耐药细胞株HCT8/VCR,采用实时荧光定量PCR法检测miR-15a和miR-16的表达,Western blot法检测bcl-2和P糖蛋白(P-gp)蛋白的表达,细胞计数盒8(CCK8)法检测不同浓度VCR对HCT8和HCT8/VCR细胞生长的抑制作用.结果 实时荧光定量PCR法检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和转染miR-15a模拟物组HCT8/VCR细胞中miR-15a的相对表达量分别为1.00、0.87±0.24和223.44±59.07,转染模拟物后,miR-15a的相对表达量明显升高(P<0.001);空白对照组、阴性对照组和转染miR-16模拟物组HCT8/VCR细胞中miR-16的相对表达量分别为1.00、0.66±0.19和107.32±22.58,转染模拟物后,miR-16的相对表达量明显升高(P<0.001).Western blot法检测结果显示,空白对照组、阴性对照组、转染miR-15a模拟物组和转染miR-16模拟物组HCT8/VCR细胞中bcl-2蛋白的相对表达量分别为1.00、0.97±0.02、0.51±0.06和0.65±0.03,转染模拟物后,bcl-2蛋白的表达下调(P<0.05).而P-gp蛋白的表达在转染模拟物后没有明显变化.CCK8法检测结果显示,经1、5、25和125 μg/ml VCR处理后,空白对照组、阴性对照组
作者:徐岷;周冰洁;王国英;王国乙;翁星月;蔡菁;李萍;陈晖;蒋小猛
来源:中华肿瘤杂志 2014 年 36卷 12期