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目的 观察血红素加氧酶1(H0-1)基因敲减对肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响,并探讨其机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人支气管上皮细胞(HBECs)和人肺癌细胞系A549、H1299、H358和H1993中HO-1 mRNA的表达水平,免疫组织化学染色检测人肺腺癌标本组织中HO-1的表达量.采用RNA干扰技术,将HO-1短发卡RNA(shRNA)转染A549细胞,制备稳定低表达HO-1的A549细胞(HO-1 shRNA组),并行RT-qPCR和Western blot验证.应用自噬诱导剂Torin1或抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1)处理HO-1 shRNA组A549细胞和对照组细胞,Western blot检测各组自噬标志物LC3B和p62的表达.采用计数法、Transwell实验和伤口愈合实验分别评估各组A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力.结果 肺癌细胞系A549、H1299、H358和H1993中HO-1 mRNA的表达均显著高于HBECs,人肺腺癌组织中HO-1过表达.未处理、Torin1处理和Baf A1处理情况下,HO-1 shRNA组细胞的LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值和p62蛋白表达量均高于相应对照组(均P<0.05);经过11d培养后,HO-1 shRNA组细胞数分别为相应对照组的41.8%、30.4%和14.0%;HO-1 shRNA组下室细胞数分别为(35.7±2.1)、(27.0±1.0)和(38.0±1.0)个/视野,均低于相应对照组[分别为(66.0±9.2)、(39.3±1.2)和(43.0±2

作者:曹琳;所信君;江伟;赵丹;闫晓洁;杨洁;马振毅

来源:中华肿瘤杂志 2019 年 41卷 11期

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作者:
曹琳;所信君;江伟;赵丹;闫晓洁;杨洁;马振毅
来源:
中华肿瘤杂志 2019 年 41卷 11期
标签:
肺腺癌 血红素加氧酶1 自噬 增殖 侵袭 迁移 Lung adenocarcinoma Heme oxygenase-1 Autophagy Proliferation Invasion Migration
目的 观察血红素加氧酶1(H0-1)基因敲减对肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响,并探讨其机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人支气管上皮细胞(HBECs)和人肺癌细胞系A549、H1299、H358和H1993中HO-1 mRNA的表达水平,免疫组织化学染色检测人肺腺癌标本组织中HO-1的表达量.采用RNA干扰技术,将HO-1短发卡RNA(shRNA)转染A549细胞,制备稳定低表达HO-1的A549细胞(HO-1 shRNA组),并行RT-qPCR和Western blot验证.应用自噬诱导剂Torin1或抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1)处理HO-1 shRNA组A549细胞和对照组细胞,Western blot检测各组自噬标志物LC3B和p62的表达.采用计数法、Transwell实验和伤口愈合实验分别评估各组A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力.结果 肺癌细胞系A549、H1299、H358和H1993中HO-1 mRNA的表达均显著高于HBECs,人肺腺癌组织中HO-1过表达.未处理、Torin1处理和Baf A1处理情况下,HO-1 shRNA组细胞的LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值和p62蛋白表达量均高于相应对照组(均P<0.05);经过11d培养后,HO-1 shRNA组细胞数分别为相应对照组的41.8%、30.4%和14.0%;HO-1 shRNA组下室细胞数分别为(35.7±2.1)、(27.0±1.0)和(38.0±1.0)个/视野,均低于相应对照组[分别为(66.0±9.2)、(39.3±1.2)和(43.0±2

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