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目的 探讨Tau蛋白聚集体对小胶质细胞活化的影响及机制.方法 纯化重组的Tau蛋白并制备Tau聚集体,处理小鼠小胶质细胞(BV2 microglia of mice,BV2),Western blot检测半乳糖凝集素(Galec-tin,Gal)-9的表达水平,酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞培养基中Gal-9蛋白的水平;体外表达纯化Gal-9蛋白,处理BV2,Western blot检测细胞中白细胞分化抗原68(Cluster of differentiation 68,CD68)和电离钙结合适配器分子 1(Lonized calcium-binding adapter molecule 1,IBA1)蛋白的表达水平;免疫荧光检测CD68的表达水平;ELISA检测细胞培养基中炎症因子肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平,逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-Polymerase chain reac-tion,RT-PCR)检测细胞中TNF-α的转录水平;Tau蛋白聚集体与短发夹RNA(Short hairpin RNA,ShRNA)-Gal-9同时处理BV2,观察阻断Gal-9的作用对小胶质细胞活化的影响.结果 与对照组比较,Tau蛋白聚集体处理BV2引起Gal-9蛋白表达增加,并释放到细胞外;Gal-9蛋白处理BV2导致其活化,CD68和IBA1表达增加;促炎性细胞因子TNF-α表达增加;阻断Gal-9的作用可减轻Tau聚集体诱导的小胶质细胞活化.结论 Tau聚集体促进BV2表达G

作者:郭笑迪;张国新;彭琴玉;张振涛

来源:卒中与神经疾病 2023 年 30卷 5期

知识库介绍

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作者:
郭笑迪;张国新;彭琴玉;张振涛
来源:
卒中与神经疾病 2023 年 30卷 5期
标签:
半乳糖凝集素-9 Tau蛋白 小胶质细胞 炎症因子 Galectin-9 Tau Microglia Inflammatory factors
目的 探讨Tau蛋白聚集体对小胶质细胞活化的影响及机制.方法 纯化重组的Tau蛋白并制备Tau聚集体,处理小鼠小胶质细胞(BV2 microglia of mice,BV2),Western blot检测半乳糖凝集素(Galec-tin,Gal)-9的表达水平,酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞培养基中Gal-9蛋白的水平;体外表达纯化Gal-9蛋白,处理BV2,Western blot检测细胞中白细胞分化抗原68(Cluster of differentiation 68,CD68)和电离钙结合适配器分子 1(Lonized calcium-binding adapter molecule 1,IBA1)蛋白的表达水平;免疫荧光检测CD68的表达水平;ELISA检测细胞培养基中炎症因子肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平,逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-Polymerase chain reac-tion,RT-PCR)检测细胞中TNF-α的转录水平;Tau蛋白聚集体与短发夹RNA(Short hairpin RNA,ShRNA)-Gal-9同时处理BV2,观察阻断Gal-9的作用对小胶质细胞活化的影响.结果 与对照组比较,Tau蛋白聚集体处理BV2引起Gal-9蛋白表达增加,并释放到细胞外;Gal-9蛋白处理BV2导致其活化,CD68和IBA1表达增加;促炎性细胞因子TNF-α表达增加;阻断Gal-9的作用可减轻Tau聚集体诱导的小胶质细胞活化.结论 Tau聚集体促进BV2表达G

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