-
Kapβ2介导的hnRNPA2/B1核转位与七氟烷脑神经毒性的关系：细胞实验
编辑人员丨6天前
目的:采用细胞实验评价核转运蛋白β2 (Kapβ2)介导的核不均一性核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)核转位与七氟烷脑神经毒性的关系。方法:采用小鼠海马细胞系HT22细胞，以2×10 5/孔和1×10 6/孔的密度接种于共聚焦培养皿和六孔培养板，采用随机数字表法分为4组( n＝12)：携带绿色荧光蛋白(GFP)空载腺病毒转染的对照组(GFP-C组)、携带GFP空载腺病毒转染的七氟烷组(GFP-Sev组)、Kapβ2基因过表达腺病毒转染的对照组(Kapβ2-C组)和Kapβ2基因过表达腺病毒转染的七氟烷组(Kapβ2-Sev组)。细胞常规培养48 h后，转染携带GFP的空载腺病毒(GFP-C组和GFP-Sev组)和Kapβ2基因过表达的腺病毒(Kapβ2-C组和Kapβ2-Sev组)。转染48 h后GFP-C组和Kapβ2-C组继续常规培养48 h；GFP-Sev组和Kapβ2-Sev组采用3%七氟烷孵育3 h，随后常规培养48 h。采用Western blot法测定细胞Kapβ2、突触素(SYP)、突触后密度蛋白95(PSD95)、hnRNPA2/B1表达，并计算hnRNPA2/B1核质比。采用免疫荧光实验进行hnRNPA2/B1亚细胞定位。 结果:与GFP-C组比较，GFP-Sev组SYP、PSD95表达下调，hnRNPA2/B1核质比降低，细胞质hnRNPA2/B1表达上调，Kapβ2-C组Kapβ2表达上调( P<0.05)；与Kapβ2-C组比较，Kapβ2-Sev组SYP、PSD95表达下调，hnRNPA2/B1核质比降低，细胞质hnRNPA2/B1表达上调( P<0.05)；与GFP-Sev组比较，Kapβ2-Sev组Kapβ2、SYP、PSD95表达上调，hnRNPA2/B1核质比升高，细胞质hnRNPA2/B1表达下调( P<0.05)。 结论:Kapβ2介导的hnRNPA2/B1核转位可能是七氟烷脑神经毒性的内源性保护机制。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
