目的:研究快速、精确获取小鼠角膜神经三维(3D)图像及其参数的技术方案。方法:选取SPF级雌性C57BL/6小鼠4只，吸入过量乙醚麻醉后使小鼠安乐死，立即在解剖显微镜下获取具有完整角膜缘的角膜4个，经过常规固定、透膜和抗β-Ⅲ微管蛋白荧光抗体标记后整铺片处理。在高分辨率去卷积显微镜下采用科学互补性金属氧化物半导体探测器捕获图像，通过显微镜系统自携带图像处理软件对图像进行3D去卷积运算，Z轴数据平面投影以及自动拼接处理得到完整的角膜神经纤维3D图像。采用交互式显微图像分析软件Imaris的丝状追踪模块中的自动检测模式获得不同区域的角膜神经密度，采用自动路径模式手动指定计算起始点到终止点的神经纤维长度。结果:在去卷积显微镜60倍油镜下，可以观察到角膜缘处呈密集网络状的基质层神经纤维在角膜缘附近进入前弹力层，并发出密集的分枝，形成基底下神经丛。这些神经丛向角膜中心伸展形成密集的神经网络样结构，在角膜顶点汇聚成漩涡状结构。少部分神经纤维丛垂直进入上皮层，并发出许多微小的神经末梢分枝。采用Imaris软件丝状物追踪模块中的自动检测模式自动统计，发现角膜神经末梢密度从角膜缘的(2 488.88±282.84)μm/μm 2逐渐增多至角膜中央的(5 766.66±298.55)μm/μm 2；角膜基质神经纤维密度从角膜缘的(40.99±0.99)μm/μm 2递减至角膜中央的(34.57±1.28)μm/μm 2。通过自动路径模式手动测量发现，角膜缘处基质层神经纤维进入前弹力层约151 μm处开始分枝形成基底下神经丛。 结论:去卷积显微镜系统可以获得整个角膜神经纤维的3D分布，Imaris图像分析软件可以自动、快速统计待测区域角膜神经纤维的不同参数。

目的:观察吲哚菁绿(ICG)同轴荧光投影和亚甲蓝(MB)染色法在肢端恶性黑色素瘤前哨淋巴结活检(SLNB)中的示踪效果。方法:回顾性分析2020年3月至2022年10月在中国科学技术大学附属第一医院确诊的需要行SLNB的肢端恶性黑色素瘤患者资料。术中同时注射ICG和MB追踪前哨淋巴结(SLN)，根据荧光标记行SLNB术。记录术中ICG、MB、ICG联合MB的SLN及转移性SLN检出情况。使用GraphPad Prism 6软件进行统计分析，SLN检出数量以 ± s表示，采用自身对照的方法，进行配对 t检验；SLN检出率用%表示，采用 χ2检验。 P<0.05为差异有统计学意义。 结果:共纳入21例患者，检出62个SLN，其中ICG、MB、ICG联合MB分别检出58个(93.5%)、41个(66.1%)、62个(100.0%)，ICG检出率显著高于MB，差异有统计学意义( χ2＝22.34， P＝0.001)。ICG、MB、ICG联合MB的SLN检出数量分别为(2.76±0.23)、(1.95±0.21)、(2.95±0.25)个/人，ICG明显多于MB，差异有统计学意义( t＝2.60， P＝0.013)。共检出10个转移性SLN，其中ICG检出10个，MB检出7个，ICG联合MB检出10个。 结论:与MB染色法相比，ICG同轴荧光投影系统在肢端恶性黑色素瘤SLNB中具有更好的应用表现，且ICG同轴荧光投影联合MB染色法比单独使用ICG同轴荧光投影有更良好的表现。

目的:通过约束最小二乘方滤波法对塑料闪烁体在射束辐照下的荧光图像进行校正,提高基于闪烁体辐射荧光的放疗3D剂量验证系统的准确性.方法:首先对正交三视角度拍摄的辐射荧光投影图进行去噪预处理,同时通过Zemax光学模拟软件计算出成像系统的点扩散函数(PSF),并用洛伦兹函数对其进行拟合调整.其次使用约束最小二乘方滤波法对去噪预处理后的正交三视投影图进行去卷积处理.最后将校正前后图像进行3D剂量分布重建,并分别与Pinnacle3治疗计划系统中计算的剂量分布数据进行比较.结果:对于4 cm×4 cm、3 cm×3 cm方野照射,应用约束最小二乘方滤波法校正后的平均2D Gamma通过率(阈值10%,3%/3 mm标准)分别提高了22.95%和5.76%,中心轴上的百分深度剂量(PDD)曲线的均方根误差(RMSE)值分别降低了1.13%和0.63%.对于2 cm×2 cm方野照射,滤波校正后的平均2D Gamma通过率(阈值20%,3%/3 mm标准)提高了1.54%,PDD曲线的RMSE值降低了0.49%.结论:在3D剂量重建前对正交三视投影图进行图像校正可以有效提高基于塑闪辐射荧光3D剂量验证系统的准确性.