目的 对小鼠耳廓蓝染类过敏检测法进行方法学的验证和优化,建立注射用益气复脉(冻干,YQFM)质控方法.方法 小鼠1次性尾iv含0.4％依文思蓝(EB)的受试物,以耳廓蓝染发生率和EB渗出量作为类过敏评价指标,以Compound 48/80为阳性对照,考察了方法的重复性、鼠耳萃取时间等影响因素,并对20140105和20140804两个批次YQFM(1 800 mg/kg)进行了耳廓蓝染类过敏试验.结果 Compound 48/80具有明显的致类过敏反应,模型稳定,重复性好;鼠耳在加入甲酰胺后室温下浸泡2～5 d进行萃取,EB含量未发生显著变化;YQFM 20140105和20140804两个批次均未发生类过敏反应.结论 小鼠耳廓蓝染类过敏检测方法较稳定,可用于YQFM质量控制.

目的 通过小鼠类过敏实验,对注射用益气复脉(冻干)(YQFM)与9种临床常用药物配伍的类过敏安全性进行评估.方法 ①小鼠耳廓蓝染类过敏实验,尾iv含有0.4％伊文思蓝(EB)的受试物:阳性对照组给予Compound 48/80-0.4％伊文思蓝(EB)的生理盐水溶液,阴性对照组给予0.4％ EB生理盐水溶液,单独药物组给予“药物-0.4％ EB的生理盐水溶液”(包括注射用辅酶A、注射用环磷酰胺、维生素C、维生素B6、奥扎格雷注射液、氨茶碱注射液、呋塞米注射液、注射用盐酸纳洛酮、注射用泮托拉唑钠9种药物),配伍药物组给予用“药物-0.4％ EB的生理盐水溶液”配制的YQFM.对小鼠耳廓蓝染面积进行评估,并测定小鼠耳廓EB渗出量.②小鼠血液组胺检测实验,除0.4％ EB生理盐水溶液均换做生理盐水外,分组给药方法与耳廓蓝染实验均相同.给药30 min后取血,化学法测定小鼠血液组胺释放率.结果 ①阳性对照、单独给药的维生素B6、注射用辅酶A、注射用盐酸纳洛酮、呋塞米注射液,配伍给药的维生素B6、注射用盐酸纳洛酮、呋塞米注射液小鼠耳廓蓝染类过敏实验结果为阳性;其他结果均为阴性;且9种药物配伍给药的EB含量升高率较单独给药有下降的趋势;②小鼠血液中的组胺的释放在配伍前后也无明显变化.结论 YQFM与9种临床常用药物配伍给药组分别与单独给药组比较,小鼠耳廓蓝染类过敏考察指标和组胺检测指标无增加类过敏发生的风险.

目的 应用类过敏体内外评价体系,初步对注射用曲札芪苷进行安全性评价.方法 采用RBL-2H3细胞模型和小鼠体内模型(ICR及昆明种),以Compound48/80和清开灵注射液为阳性对照组,体外采用MTT法检测细胞活力,以组胺和β-氨基己糖苷酶的释放率为检测指标;体内通过尾静脉注射含伊文思蓝的受试物,检测小鼠耳廓蓝染发生率,伊文思蓝渗出量,血液中组胺、免疫球蛋白IgE(IgE)及细胞内皮生长因子含量.结果 RBL-2H3细胞体外检测显示,200μg·mL-1注射用曲札茋苷与阴性对照组比较,组胺和β-氨基己糖苷酶释放率差异无统计学意义;相当于临床剂量50倍(1.75 mg·mL-1)的注射用曲札茋苷未引起小鼠发生类过敏反应.结论 初步建立的类过敏反应体内外检测体系,适用于中药注射剂类过敏反应的快速筛查,注射用曲札芪苷在该体系中未见类过敏反应发生,初步说明具有较高的安全性.

目的 采用小鼠耳廓蓝染实验对骨肽类注射剂类过敏反应进行评价,探究不同剂量的骨肽类注射剂引起类过敏反应的情况.方法 分别以磷酸组胺、组胺盐酸盐、组胺作为阳性药,筛选适宜的阳性模型;对不同剂量下的骨肽类注射剂进行小鼠耳廓蓝染实验,以蓝染率及伊文思蓝(evans blue,EB)升高率作为类过敏评价指标.结果 以磷酸组胺作为阳性药建立的阳性模型,具有明显的类过敏反应.部分骨肽类注射剂在高、中剂量下呈不同程度的阳性反应,低剂量下均呈阴性反应.结论 通过小鼠耳廓蓝染实验得到的检测结果,直观评价了不同剂量下骨肽类注射剂的类过敏反应,对其他复杂基质药物类过敏反应的评估和研究具有借鉴意义.