目的 探讨微小核苷酸-211(microRNA-211,miR-211)与 β-晶体蛋白B2(β-crystalin B2)参与的年龄相关性白内障的作用及其机制.方法 通过CCK-8以及流式细胞术检测不同浓度双氧水或不同表达miR-211后HLEC-3细胞活性的变化.生物信息学方法预测miR-211与Notch2潜在的结合位点.Westren blot以及逆转录定量PCR(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法检不同表达miR-211后HLEC-3细胞中Nocth2蛋白以及Mrna的变化.采用荧光素酶报告方法确认miR-211与Notch2的靶向性.Western blot检测单独miR-211或共表达miR-211+Notch2或低表达Notch2后 β-crystallin B2蛋白的变化.结果 过氧化氢(hydrogen peroxide,H 2 O2)能够明显降低HLCE-3细胞的活性(t=3.67,P<0.05).下调miR-211可以明显抑制H 2 O2诱导的晶状体上皮细胞(HLEC-B3)凋亡(t=4.07,P<0.05);上调miR-211则可以显著地加重氧化因子表达(t=4.21,P<0.05).同时,荧光素酶(luciferase)和Western blot研究实验表明,上调miR-211靶向抑制Notch2的表达(t值分别为4.02和3.90,P值均<0.05).与此相一致的是,下调miR-211则可以恢复Notch2的蛋白表达水平(t=4.04,P<0.05).除了Notch2之外,miR-211 inhibitor也可以增加 β-crystallin B2的表达,而沉默Notch2表达后,则可以明显抑制由miR-211 inhibitor引起的 β-crystallin B2表达升高(t值分别为4.20,4.19和4.15,P值均<0.05).结论 miR-211靶向调控Notch2表达使β-crystallin B2的表达增加,表明miR-211可能是治疗年龄相关白内障的潜在药物靶点.

目的 研究长非编码RNA LINC00671(long non-coding RNA LINC00671)对胰腺癌细胞增殖与侵袭的调节作用及其可能的下游调控机制.方法 取胰腺癌Panc-1细胞系随机分为pc-NC组、pc-LINC00671组、miR-NC组以及miR-221-5p mimic组.pc-NC组转染过表达空载质粒(pcDNA3.0-NC),pc-LINC00671组转染LINC00671过表达质粒(pcDNA-LINC00671),miR-NC组转染阴性对照寡核苷酸,miR-221-5p mimic组转染miR-221-5p模拟物.以实时定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测组织或细胞中LINC00671以及miR-221-5p的表达.以细胞计数法(cell counting kit-8,CCK-8)检测各组细胞的细胞存活率,用Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力.结果 LINC00671在胰腺癌组织及其相匹配的癌旁组织中的表达量分别为1.01±0.19和0.71±0.18,在人正常胰腺导管上皮细胞系(HPDE6-C7)和胰腺癌细胞系(Panc-1)中的表达量分别1.00±0.11和0.45±0.04,差异有统计学意义(P<0.05).48 h时,pc-NC组和pc-LINC00671组的细胞存活率分别为(92.72±4.97)％和(78.09±6.08)％,miR-NC组和miR-211-5p mimic组的细胞存活率分别为(104.66±4.85)％和(126.01±11.24)％;72 h时,pc-NC组和pc-LINC00671组的细胞存活率分别为(92.29±6.53)％和(68.03±6.17)％,miR-NC组和miR-211-5p mimic组的细胞存活率分别为(102.68±3.09)％和(120.48±9.10)％;pc-NC组和pc-LINC00671组中侵袭细胞数目分别为61.67±3.40和36.67±4.50,miR-NC组和miR-221-5p mimic组中侵袭细胞数目分别为40.67±4.78和60.33±4.50;pc-NC组与pc-LINC00671组相比,miR-211-5p mimic组与miR-NC组相比,pc-LINC00671+miR-211-5p mimic组与pc-LINC00671组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 在胰腺癌中,LINC00671可抑制胰腺癌细胞的增殖与侵袭,而miR-221-5p可促进胰腺癌细胞的增殖与侵袭,LINC00671可靶向miR-221-5p促进SOCS1的表达.