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水稻根部2-酮戊二酸感应蛋白OsGlnB的铵同化碳架结合特性
编辑人员丨2023/8/6
为了揭示2-酮戊二酸(2-OG)感应蛋白OsGlnB在水稻根部铵同化碳架调节中的功能,本文采用2-OG、草酰乙酸(OAA)或丙酮酸(PYR)营养液处理水稻(Oryza sativa L.cv.9311)幼苗,检测根部谷氨酰胺合成酶(GS)活性和OsGlnB基因转录量.克隆表达并分离纯化根部OsGlnB蛋白,采用同源模建、分子对接与等温滴定鉴定该信号蛋白与碳架效应物的相互作用.结果表明所选碳架分子中只有2-OG和OAA促使根部GS活性与OsGlnB基因转录量同步上升,2-OG与ATP含量也相应升高.同源模建与分子对接表明OsGlnB蛋白与ATP-Mg2+形成的复合物能有效结合2-OG或OAA,但不能结合PYR.等温滴定证明2-OG与上述复合物的结合常数大于OAA,未检测到丙酮酸热效应,结果与分子对接结论一致.本研究说明碳架效应物结合2-OG感应蛋白是这类碳营养信号调节水稻根部铵同化的必要条件.
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编辑人员丨2023/8/6
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茶树胞质型谷氨酰胺合成酶基因CsGS1s的克隆及表达分析
编辑人员丨2023/8/6
谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)是植物氮素同化过程中的限速酶.本试验选取茶树(Camellia sinensis)'龙井43'为材料,利用RACE法克隆得到3个茶树CsGS1s基因成员.序列分析显示CsGS1.1、CsGS1.2和CsGS1.3基因全长分别为1634、1482和1398 bp,其开放阅读框长度均为1071 bp,编码356个氨基酸;CsGS1s蛋白均为亲水性、非分泌蛋白,定位在细胞质中且无跨膜结构.序列比对显示CsGS1.1s具有GS1基因家族的特征区域.系统进化树分析表明,CsGS1.1s与拟南芥(Arabidopsis thaliana)、油菜(Brassica napus)、大麦(Hordeum vulgare)、水稻(Oryza sativa)以及玉米(Zea mays)的GS1表现出较近的亲缘关系.CsGS1s组织特异性表明,CsGS1.1和CsGS1.3在根部表达量最高,CsGS1.2主要在叶中表达,但总体来看CsGS1.2在上述器官的表达丰度极低.利用实时荧光定量PCR对茶树在不同氮源处理下的表达进行检测,结果表明,在茶树叶中,CsGS1.1的表达量主要在NO3-处理后期才显著提高,而CsGS1.2和CsGS1.3的表达量则主要受NH4+处理的影响;在茶树根中,CsGS1s的表达水平受铵态氮的诱导显著高于硝态氮,尤其是CsGS1.1和CsGS1.2.
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编辑人员丨2023/8/6
