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吸入毒理云暴露系统的阳性验证体系的摸索
编辑人员丨1个月前
目的 探索云暴露系统用于吸入毒理体外暴露实验的可行性.方法 采用高、中、低(800、400、200 mg·L-1)3个浓度的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)通过云暴露系统对气液界面(air-liquid interface,ALI)培养的Calu-3细胞进行暴露,磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)暴露作阴性对照组,暴露1次,另取高浓度LPS溶液暴露5次,暴露结束后3 h和24 h分别检测Calu-3细胞的活性、乳酸脱氢酶(LDH)释放量、跨上皮电阻值(TEER)、黏蛋白MUC5AC以及炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α表达.结果 与PBS阴性对照组相比,高、中、低3种浓度的LPS气液界面暴露于Calu-3细胞模型后,细胞的活性、LDH释放量无显著变化,但细胞电阻值降低,细胞的屏障功能受损;随着暴露浓度的升高,LPS促进细胞黏蛋白MUC5AC的表达,使细胞IL-6、IL-8表达下降,TNF-α表达上升;随着暴露频率的增加,LPS会抑制黏蛋白的表达,使IL-6表达上升;暴露频率增加的同时延长暴露后的检测时间会使细胞IL-8、TNF-α表达上升.结论ALT云暴露的方式可以有效反映细胞对阳性受试物的反应,此体外暴露方法可以用于后续暴露实验来评价化合物的吸入毒性.
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编辑人员丨1个月前
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雾化丙三醇气液界面云暴露对人肺上皮细胞的毒性
编辑人员丨2023/8/6
目的 采用气液界面暴露方式考察丙三醇气溶胶对人肺腺癌细胞(A549)的毒性,为丙三醇在吸入药物辅料和电子烟中的安全应用提供参考.方法 采用VITROCELL云暴露系统对气液界面培养的A549细胞进行暴露,利用荧光素钠验证系统的递送效率.丙三醇气溶胶气液界面暴露试验,设置阴性对照组(1%PBS),丙三醇高、中、低剂量组(10%、6%、4%),考察细胞存活率,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogen-ase,LDH)的释放,以及白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达.结果 暴露系统递送剂量准确,递送效率高,沉积率为53.4%,重复性(14.8%)和孔间差异(5.2%)等结果良好.丙三醇暴露后,与阴性对照组相比,A549细胞的存活率、LDH释放量、IL-6的表达均无显著性差异.结论 本研究建立了一种可靠且快速的体外呼吸道急性暴露模型,单次短时间暴露丙三醇对细胞存活率和细胞毒性以及炎症因子表达无显著影响.
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编辑人员丨2023/8/6
