目的:探究黄芩素对哮喘小鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、迁移及Janus蛋白酪氨酸激酶(JAK)/信号转导和转录活化蛋白(STAT)通路的影响.方法:取小鼠原代ASMCs进行分离与培养,采用重组小鼠血小板衍生生长因子(PDGF)诱导小鼠ASMCs增殖,分别加入不同浓度的黄芩素(0μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L).另设对照组、JAK/STAT信号通路激活剂白介素6(IL-6)与黄芩素联用组(50 ng/ml的IL-6和40 μmol/L的黄芩素),于培养箱中继续培养48 h.MTT法检测ASMCs增殖情况;划痕愈合实验检测ASMCs迁移能力;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞培养上清中IL-6、IL-8水平;蛋白免疫印迹(western blot)检测JAK2、STAT3及其磷酸化蛋白表达.结果:与对照组相比,PDGF组细胞增殖率、迁移率、IL-6、IL-8水平、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3表达显著升高(P＜0.05);与PDGF组相比,20μmol/L、40 μmol/L黄芩素组细胞增殖率、迁移率、IL-6水平、IL-8水平、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3表达明显降低(P＜ 0.05);IL-6+40μmol/L黄芩素联用组能明显逆转黄芩素对ASMCs增殖、迁移及炎性因子、JAK2/STAT3通路的抑制作用(P＜0.05).结论:黄芩素可抑制哮喘小鼠气道平滑肌细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关.

目的 观察中药复方WCAP及其拆方对人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤生长及对白介素-6/信号转导和转录激活因子3(IL-6/STAT3)信号通路的影响.方法 建立人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,将30只SPF级裸小鼠随机分为6组,即空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、复方组、健脾组、清热解毒组和软坚散结组,每组5只,观察各组裸小鼠皮下移植瘤瘤质量及抑瘤率,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western blot法分别检测瘤组织中IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc癌基因(c-myc)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA和蛋白表达水平.结果 ①与空白对照组比较,各干预组瘤质量均轻于空白对照组,5-FU组、复方组及各拆方组均可抑制裸小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.05),复方组抑瘤率高于各拆方组(P<0.05).②与空白对照组比较,5-FU组、复方组和软坚散结组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的mRNA表达均降低(P<0.05).③与空白对照组比较,5-FU组、复方组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因涉及的c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2蛋白表达均降低(P<0.05),软坚散结组c-myc、MMP-2和IL-6蛋白表达均降低(P<0.05).结论 WCAP复方可抑制人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤的生长,其机制与抑制IL-6/STAT3通路并调节其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的表达水平有关;与各拆方相比,WCAP复方在抑瘤率、小鼠体质量及IL-6/STAT3通路及其下游靶基因调控方面作用更好.

目的 探讨决明子多糖通过调节白介素-6(IL-6)/Janus激酶 2(JAK2)/信号转导与转录激活因子 3(STAT3)通路对高糖诱导的视网膜神经节细胞损伤的影响.方法 将视网膜神经节细胞RGC-5 分为:对照组(正常培养的RGC-5细胞)、高糖组(50 mmol/L葡萄糖处理细胞)、决明子多糖低剂量组(50 mmol/L葡萄糖+15 mg/L决明子多糖)、决明子多糖高剂量组(50 mmol/L葡萄糖+60 mg/L决明子多糖)、激活剂组(50 mmol/L葡萄糖+60 mg/L决明子多糖+0.5 μmol/L JAK2/STAT3 激活剂colivelin)、激活剂对照组(50 mmol/L葡萄糖+0.5 μmol/L JAK2/STAT3 的激活剂colivelin);CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;ELLSA法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷氨酸(Glu)含量;Western blot检测细胞中IL-6、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酸蛋白酶 3(caspase-3)、自噬微管相关蛋白轻链 3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1 的表达.结果 与对照组比较,高糖组RGC-5细胞的OD450 值、SOD活性、PCNA表达降低,细胞凋亡率、MDA水平、Glu含量、IL-6、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、caspase-3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1表达上升(P＜0.05);与高糖组比较,决明子多糖低剂量组、决明子多糖高剂量组RGC-5 细胞的OD450 值、SOD活性、PCNA表达升高,细胞凋亡率、MDA水平、Glu含量、IL-6、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、caspase-3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1 表达降低(P＜0.05);加入JAK2/STAT3的激活剂colivelin后,减弱了决明子多糖对RGC-5细胞增殖的促进作用,且细胞凋亡能力、氧化应激和自噬反应增强.结论 决明子多糖可通过抑制IL-6/JAK2/STAT3 通路对高糖诱导的视网膜神经节细胞起到保护作用.