-
白斑蛾蚋幼虫肠道可培养细菌的分离鉴定与产消化酶活性分析
编辑人员丨2023/8/5
目的 分离白斑蛾蚋幼虫肠道可培养细菌,并测定其产消化酶活性和耐药性,探讨肠道细菌对白斑蛾蚋幼虫消化食物及其环境适应的影响.方法 采用传统分离培养的方法,分离纯化白斑蛾蚋幼虫肠道可培养细菌,通过16S rRNA序列分析进行分子鉴定,利用平板透明圈法筛选产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶的细菌,通过水解圈(D)与菌落直径(d)的比值,比较不同细菌的产消化酶活性.利用SPSS 20.0软件进行统计学分析,组间比较采用单因素方差分析,当方差齐时用SNK多重比较方法;方差不齐时用Dunnett's T3进行显著性分析.针对不同肠道可培养细菌采用纸片扩散法进行药敏试验分析.结果 在白斑蛾蚋幼虫肠道中分离到可培养细菌有5属12种细菌,其中芽孢杆菌属7种,分别为越南芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌枯草亚种、苏云金芽孢杆菌、阿氏芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌和巴基斯坦短小芽孢杆菌;肠球菌属2种,分别为铅黄肠球菌、鹑鸡肠球菌;微小杆菌属、白色杆菌属和葡萄球菌属各1种,分别为深海微小杆菌,Leucobacter celer subsp.和松鼠葡萄球菌.在分离到的白斑蛾蚋肠道可培养细菌中,可产淀粉酶活性的细菌有8种,产蛋白酶活性的细菌有6种,未筛选到产纤维素酶和脂肪酶活性的细菌.8种细菌的产淀粉酶活性差异有统计学意义(F=8.779,P＜0.001).其中越南芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌枯草亚种和深海微小杆菌的产淀粉酶活性较强;6种细菌的产蛋白酶活性差异有统计学意义(F=23.980,P＜0.001),其中越南芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌枯草亚种产蛋白酶活性较强.药敏实验表明,松鼠葡萄球菌对6种抗生素耐药,鹑鸡肠球菌对5种抗生素耐药,阿氏芽孢杆菌和铅黄肠球菌对4种抗生素耐药.结论 白斑蛾蚋幼虫肠道可培养细菌具有产淀粉酶和蛋白酶能力,可能协助消化和分解食物.肠道细菌普遍具有一定的耐药性,有助于白斑蛾蚋幼虫在污浊的环境中更好的生存.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/5
-
DNA条形码技术在人体排出未知昆虫幼虫鉴定中的应用
编辑人员丨2023/8/5
目的 使用DNA条形码鉴定方法对两名儿童从尿道排出的不明昆虫幼虫进行鉴定,解决未知昆虫幼虫无法利用传统形态学鉴定方法进行鉴定的难题,为主诊医生后期制定针对性治疗方案提供科学依据.方法 以家长收集并送检的患儿从尿道排出的不明活体昆虫幼虫为材料,先进行图像采集和形态学描述,然后取部分昆虫幼虫组织提取基因组DNA,利用多细胞无脊椎动物线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)的通用引物进行DNA扩增,PCR产物直接从两端测序,DNA测序结果以MEGA6软件验证图谱确定为有效序列后,经拼接、去除通用引物序列,最终得到658 bp的COⅠ基因片段碱基序列.上传数据与GenBank和BOLD数据库中的序列进行同源性比对,建立系统发育树.结果 序列测定结果与GenBank和BOLD中公布的白斑蛾蚋(Clogmia albipunctata)的COⅠ序列相似性为100％.选取GenBank中与目的片段核苷酸序列比较所得相似性较高的7种物种序列,以红头丽蝇为外群,构建NJ树,发现昆虫幼虫的序列以及Gen-Bank 中的白斑蛾蚋聚为一类,毛蠓科的全部物种聚成一支,置信度高达 100％.结论 根据实验结果可以判断这两名儿童从尿道排出的不明昆虫活虫为白斑蛾蚋的幼虫.DNA条形码技术不仅可以快速准确识别物种种类,还能鉴定近缘种,发现隐存分类单元,是对非成虫发育形态昆虫的快速、准确的种类鉴定方法,可以有效弥补形态学鉴定方法的不足.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/5
