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紫红獐牙菜酮提取物抑制脊髓损伤后炎性反应及凋亡的机制研究
编辑人员丨5天前
目的:探讨紫红獐牙菜酮提取物抑制脊髓损伤后炎性反应及凋亡机制。方法:PC-12细胞购自美国典型培养物保藏中心。采用脂多糖(LPS)处理PC-12细胞建立脊髓损伤细胞模型(LPS组),未经处理细胞为NC组;不同浓度紫红獐牙菜酮提取物处理LPS组细胞;将抗微小核糖核酸(miR)-NC和抗miR-136-5p转染至LPS细胞(标记为抗miR-NC+LPS组、抗miR-136-5p+LPS组);将miR-NC、miR-136-5p转染至60 μg/ml紫红獐牙菜酮提取物处理的LPS组细胞(标记为60 μg/ml紫红獐牙菜酮提取物+miR-NC+LPS组、60 μg/ml紫红獐牙菜酮提取物+miR-136-5p+LPS组)。溴化-3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基四氮唑(MTT)检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质印迹法(Western blot)检测剪切的半胱天冬酶-3(cleaved Caspase-3)、磷酸化p65(p-p65)及磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白表达;酶联免疫吸附法法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-136-5p表达。两组间比较行 t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK检验。 结果:15 mg/ml紫红獐牙菜酮提取物+LPS组、30 mg/ml紫红獐牙菜酮提取物+LPS组及60 mg/ml紫红獐牙菜酮提取物+LPS组细胞活性显著高于LPS组(0.67±0.06、0.96±0.09、1.05±0.10比0.54±0.05),凋亡率[(16.13±1.25)%、(10.23±0.91)%、(6.89±0.63)%比(19.43±1.61)%]、cleaved Caspase-3蛋白表达水平(0.71±0.06、0.56±0.05、0.43±0.04比0.87±0.07)、IL-1β[(131.02±11.63)、(95.36±9.63)、(72.69±6.94) pg/ml比(169.32±13.52) pg/ml]、IL-6[(203.81±18.51)、(151.87±13.21)、(115.93±10.06) pg/ml比(243.61±22.25) pg/ml]、TNF-α[(1.82±0.04)、(1.43±0.12)、(1.14±0.09) pg/ml比(2.13±0.19) pg/ml]及miR-136-5p(2.21±0.17、1.61±0.14、1.23±0.11比2.67±0.24)表达显著低于LPS组,差异有统计学意义( F=83.393、288.901、125.546、173.231、131.432、116.412、167.637, P<0.05)。抗miR-136-5p+LPS组细胞活性显著高于抗miR-NC+LPS组(1.02±0.10比0.56±0.03),凋亡率[(6.35±0.59)%比(18.46±1.57)%]、cleaved Caspase-3(0.43±0.04比0.88±0.07)、IL-1β[(65.39±6.11) pg/ml比(170.02±14.15) pg/ml]、IL-6[(98.61±9.24) pg/ml比(241.02±19.47) pg/ml]、TNF-α[(1.01±0.09) pg/ml比(2.18±0.17) pg/ml]及miR-136-5p(0.46±0.04比1.00±0.11)表达显著低于抗miR-NC+LPS组,差异有统计学意义( t=13.841、12.504、21.661、16.745、20.366、19.824、18.248, P<0.05)。60 μg/ml紫红獐牙菜酮提取物+miR-136-5p+LPS组细胞p-p65和p-IκBα表达显著高于60 μg/ml紫红獐牙菜酮提取物+LPS组和60 μg/ml紫红獐牙菜酮提取物+miR-NC+LPS组(p-p65分别0.85±0.09比0.40±0.04、0.39±0.08,p-IκBα分别0.73±0.08比0.33±0.03、0.32±0.08),差异有统计学意义( F=106.301、103.892, P<0.05)。 结论:紫红獐牙菜酮提取物可通过下调miR-136-5p表达抑制脊髓损伤后炎性反应及细胞凋亡。
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编辑人员丨5天前
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紫红獐牙菜中的(口山)酮类成分及其细胞毒活性
编辑人员丨2023/8/6
采用色谱分离手段对紫红獐牙菜Swertia punicea的乙醇提取物中乙酸乙酯和石油醚萃取部分进行分离纯化,运用1H NMR、13C NMR、HSQC、HMBC和ESI-MS等波谱方法和文献数据对比鉴定化合物结构,从紫红獐牙菜全草中得到8个(口山)酮类化合物,分别鉴定为1-羟基-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮(1)、1,2,3,4,5-五甲氧基(口山)酮(2)、1-羟基-2,3,4,7-四甲氧基(口山)酮(3)、1-羟基-2,3,5-三甲氧基(口山)酮(4)、dulcisxanthone C(5)、1-羟基-2,3,7-三甲氧基(口山)酮(6)、1,5-二羟基-2,3-二甲氧基(口山)酮(7)、1-羟基-3,4,5-三甲氧基(口山)酮(8),所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物1、4、5、7对HepG-2显现了很好的细胞毒活性.
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编辑人员丨2023/8/6
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紫红獐牙菜(口山)酮提取物对MPTP致帕金森病小鼠模型的神经保护作用及其机制
编辑人员丨2023/8/6
目的:探究紫红獐牙菜(口山)酮提取物对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)致帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠的神经保护作用及其作用机制.方法:小鼠灌胃(ig)给药14d(9.0 mg·kg-1),后5d腹腔注射(ip,30 mg· kg-1)MPTP建立模型,之后进行酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组织化学染色、非标记定量蛋白质组学法检测和生物信息学分析.结果:紫红獐牙菜(口山)酮提取物可减少MPTP致帕金森小鼠脑黑质部位多巴胺能神经元的丢失;筛选出150个给药组与模型组之间的差异表达蛋白质;其潜在作用信号通路为泛素介导的蛋白水解、核糖体、硫胺素代谢通路,核心差异蛋白有Hspa13,Rplp1,Rplp2和Rps8.结论:紫红獐牙菜(口山)酮提取物对MPTP所致帕金森小鼠具有神经保护作用,其潜在机制可能包括减少α-syn错误折叠,抑制星形胶质细胞过度活化,减少活性氧簇,减轻炎症反应等.
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编辑人员丨2023/8/6
