目的 研究醒脑灌肠液对心搏骤停(CA)心肺复苏(CPR)后大鼠海马神经细胞中凋亡相关因子B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3 的表达趋势的影响.方法 SD雄性大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(CPR)组、醒脑灌肠液(XNGC)组、安宫牛黄丸(AGNH)组,其中AGNH组为阳性对照.按照Utstein模式建立CA/CPR模型:对CPR组、XNGC组和AGNH组大鼠行窒息法CA后CPR,当自主循环恢复(ROSC)时,在 0、24、48 h分别对XNGC组和AGNH组大鼠灌肠给药.各组进行神经功能缺陷评分(NDS)后取脑组织.苏木素-伊红(HE)染色法观察脑海马组织情况.用免疫组化法(IHC)和Western印迹观察脑海马区Bcl-2、Bax、Caspase-3 的蛋白表达情况,并对48h时存活率进行统计.结果 XNGC组和AGNH组较之CPR组神经功能评分有明显差异(P<0.05).与CPR组相比,XNGC组和AGNH组海马区Bax、Caspase-3 表达量明显降低,Bcl-2 表达量明显升高(P<0.05).XNGC组和AGNH组存活率较CPR组明显升高(P<0.05).结论 醒脑灌肠液可能通过下调凋亡因子和上调抗凋亡因子发挥脑保护作用.

目的 探究醒脑灌肠液联合健脾益智胶囊对脑卒中大鼠原肌球蛋白受体激酶(Trk)B表达、运动功能、Notch1信号的影响.方法 将所选取的大鼠随机为模型组(M组),对照组(D组),醒脑灌肠液组(X组),健脾益智胶囊组(J组),醒脑灌肠液联合健脾益智胶囊组(L组),剔除造模失败大鼠,每组6 只.采用Carcia评分评价大鼠运动功能,Western印迹法检测Notch1 蛋白含量,转角实验评价大鼠神经功能,组织免疫化学染色法检测TrkB蛋白阳性表达情况,qRT-PCR法检测TrkB、Notch1 mRNA表达量来探究醒脑灌肠液联合健脾益智胶囊对脑卒中大鼠TrkB表达、运动功能、Notch1 信号的影响.结果 建模成功后第1 天,各组Carcia评分、运动功能评分差异无统计学意义(均P＞0.05),随着时间的延长,D组转角Carcia评分及运动功能评分无明显改变,X组、J组Carcia评分明显上升,但两组评分差异无统计学意义(P＞0.05).与X组、J组相比较,L组评分出现明显升高(均P＜0.05),D组、J组、L组运动功能评分出现明显好转,与X组、J组相比较,L组运动功能评显著升高(均P＜0.05),X组、J组运动功能评分差异无统计学意义(P＞0.05).D组海马组织的TrkB阳性蛋白数、Notch1 蛋白含量、TrkB、Notch1 mRNA表达量最高,M组最低,与X组、J组比较,L组海马组织中TrkB阳性数、Notch1 蛋白含量、TrkB、Notch1 mRNA表达量显著升高(均P＜0.05).L组相比较,两组TrkB阳性数、Notch1 蛋白含量、TrkB、Notch1 mRNA表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 醒脑灌肠液与健脾益智胶囊均对脑卒中模型大鼠存在一定的治疗效果,能够改善大鼠的运动、神经功能,但醒脑灌肠液与健脾益智胶囊两种药物联合效果更佳,改善指标更为显著,其作用机制可能为上调大鼠海马组织中TrkB、Notch1 信号表达水平.

醒脑灌肠液为崔应麟教授所创,临床上常用于治疗出血性中风急性期,有良效.笔者根据传统中医学理论并结合现代化科研成果,对其进行方解并对其单味药药理作用予以分析.

目的:探讨醒脑灌肠液对脑出血大鼠不同时间点炎症因子的调节作用,研究其脑保护作用机制.方法:建立脑出血(ICH)模型,将Wistar雄性大鼠随机分成6组:空白组、假手术组、模型对照组、安宫牛黄丸0.27g/kg组、醒脑灌肠液1.80g/kg和3.60 g/kg组.各组大鼠分别灌肠给予对应的药物,在给药12 h、24 h、3d、7d后,采集样本.ELISA法检测出血侧脑组织TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-4和IL-10的含量,Western blot法检测脑组织TSG-6蛋白的表达,TUNEL法检测神经细胞凋亡的情况.结果:与假手术组相比,在4个时间点,模型组脑组织中TNF-α、IL-6和IFN-γ的含量均显著升高,IL-4、IL-10的含量在出血后初期先升高后降低,脑组织TSG-6的蛋白表达显著下调,细胞凋亡指数在第3d时达高峰.与模型组相比,安宫牛黄丸和醒脑灌肠液各剂量组均能够显著降低TNF-α、IL-6、IFN-γ的含量以及细胞凋亡指数,显著升高IL-4、IL-10的含量,上调TSG-6蛋白的表达.结论:脑出血后,醒脑灌肠液通过调节细胞因子的释放,抑制炎症反应,抑制神经细胞的凋亡,发挥脑保护作用.

目的:研究醒脑灌肠液对心肺复苏后大鼠脑损伤及IL-33/ST2信号通路的影响,以探讨醒脑灌肠液对心肺复苏后大鼠的脑保护作用及机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、醒脑灌肠液低剂量(5 mL/kg)组、醒脑灌肠液中剂量(10 mL/kg)组、醒脑灌肠液高剂量(20 mL/kg)组和乌司他丁组,每组12只,除假手术组,其它各组建立大鼠心肺复苏模型,并相应给予醒脑灌肠液和乌司他丁治疗.7d后所有大鼠进行神经功能缺损评分;处死大鼠检测脑组织含水量;以苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠脑组织病理性变化;以超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)检测试剂盒分别检测脑组织中SOD和MDA水平;以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中S100钙结合蛋白β亚基(S100β)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量及脑组织中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;以Western blot法检测脑组织白细胞介素33(IL-33)和生长刺激表达基因2蛋白(ST2)表达.结果:与假手术组相比,模型组大鼠脑组织出现组织结构紊乱,局灶出血,神经元核收缩、凋亡等病理改变;神经功能缺损评分升高,脑组织含水量,血清S100β、NSE、IL-1β和TNF-α水平,以及脑组织MDA、IL-33和ST2水平均显著升高,SOD水平显著降低(P<0.05).与模型组相比,醒脑灌肠液低、中、高剂量组和乌司他丁组大鼠脑组织病理损伤减轻,神经功能缺损评分减少,脑组织含水量,血清S100β、NSE、IL-1β和TNF-α水平,以及脑组织MDA、IL-33和ST2水平均降低,SOD水平升高(P<0.05).醒脑灌肠液各剂量之间有剂量依赖性,醒脑灌肠液高剂量组与乌司他丁组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论:醒脑灌肠液可修复心肺复苏后大鼠脑损伤,下调IL-33/ST2信号通路可能是其作用机制.

目的 探讨醒脑灌肠液通过抗氧化应激对脑出血(ICH)大鼠血脑屏障保护作用的影响.方法 Wistar雄性大鼠采用胶原酶法制备ICH模型,并随机分成5组:假手术组、模型组、安宫牛黄丸组(0.27g/kg)、醒脑灌肠液3.60g/kg组、醒脑灌肠液1.80g/kg组.另不造模Wistar雄性大鼠设为空白组.空白组,假手术组和模型组分别给予生理盐水,其余各组予对应的药物,连续灌肠3d后,采集样本,Western blot检测ICH大鼠脑组织NOX2、Nrf2和MMP-9的表达,全自动酶标仪检测血清中GSH含量,免疫组化法检测Claudin-5,ZO-1和VE-cadherin-2蛋白的表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠出血侧脑组织的Claudin-5(P ＜0.01)、ZO-1(P ＜0.01)、VE-cadherin-2(P ＜0.05)的表达显著下调,NOX2(P＜0.01)、Nrf2(P＜0.01)的表达显著升高,GSH(P＜0.01)的含量显著降低,MMP-9(P＜0.01)的表达显著升高;与模型组相比,安宫牛黄丸组ICH大鼠出血侧脑组织Claudin-5(P ＜0.05)、ZO-1(P ＜0.01)、VE-cadherin-2(P ＜0.05)的表达显著上调,NOX2(P＜0.01)、Nrf2(P＜0.01)的表达显著降低,GSH(P＜0.01)的含量显著升高,MMP-9(P＜0.05)的表达显著降低;醒脑灌肠液3.60g/kg组ICH大鼠出血侧脑组织Claudin-5(P ＜0.01)、ZO-1(P ＜0.01)、VE-cadherin-2(P＜0.01)的表达显著上调,NOX2(P＜0.05)、Nrf2(P＜0.01)的表达显著降低,GSH(P ＜0.01)的含量显著升高,MMP-9的表达显著降低(P＜0.05).结论 醒脑灌肠液能够上调血脑屏障相关蛋白Claudin-5、Z0-1、VE-cadherin-2的表达,对脑出血大鼠具有脑保护作用,其机制可能通过抑制氧化应激反应,下调MMP-9的表达,从而促进血脑屏障的修复.

第二届全国名中医崔应麟教授认为痰邪是中风病形成、变化、预后转归的重要因素,然而痰邪随着中风病程的改变,其自身也发生着变化,故提出"基于痰之新久,分期论治"的学术思想.其认为中风病的治疗,应从痰之新久入手,并根据具体病程及兼症的不同,分期论治.同时,其还独创醒脑灌肠液、康益胶囊等,应用于临床,疗效甚佳.笔者有幸成为崔教授的学术思想继承人,在跟师学习中对崔教授的"基于痰之新久,分期论治"的学术思想,以及学术渊源进行了整理;对"痰致中风"的病因病机及发病特点进行了归纳;对"痰致中风"的临床用药经验进行了总结,为中医药治疗中风病提供理论依据.