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东、西方蜜蜂对黑尾胡蜂表皮碳氢化合物的触角电位反应
编辑人员丨2024/4/27
表皮碳氢化合物是昆虫种内和种间识别的重要信息化合物,探究黑尾胡蜂Vespa soror表皮碳氢化合物的种类及蜜蜂的电生理反应对理解蜜蜂与胡蜂间的化学通讯具有重要意义.本研究采用有机溶剂浸提法结合气相色谱-质谱联用技术分析了黑尾胡蜂翅和足的表皮碳氢化合物种类及相对含量,利用昆虫触角电位(EAG)技术分析了东方蜜蜂Apis cerana、西方蜜蜂A.mellifera对其的反应.结果表明,黑尾胡蜂表皮碳氢化合物由C23～C31的31种碳氢化合物构成,其中烷烃类物质26种、烯烃5种,甲基支链烷烃的含量最高,在翅和足中的相对含量分别是58.72%和71.44%.东、西方蜜蜂均对黑尾胡蜂的表皮碳氢化合物产生显著的EAG反应(P<0.001),且东方蜜蜂的EAG相对反应值显著高于西方蜜蜂(P<0.05),说明东方蜜蜂对黑尾胡蜂表皮碳氢化合物的敏感性比西方蜜蜂更高,这可能与两者长期协同进化形成的捕食与反捕食关系有关.
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编辑人员丨2024/4/27
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黑尾胡蜂磷脂酶A1的分离纯化和活性研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 对黑尾胡蜂磷脂酶的分离方法和活性进行研究,为黑尾胡蜂的毒性机制研究和药用发掘提供实验数据.方法 通过葡聚糖凝胶G-75分子筛柱和肝素亲和柱对黑尾胡蜂毒液中的磷脂酶活性成分进行分离.利用质谱对目的蛋白进行肽指纹图谱分析,利用蛋白测序仪测定目的蛋白N末端氨基酸序列,从结构上对目的蛋白进行鉴定.利用磷脂酶A1检测试剂盒确认目的蛋白对底物磷脂的特异性水解位点,从活性上对目的蛋白进行鉴定.通过血浆复钙时间的测定检测目的蛋白对凝血系统的影响.结果 通过葡聚糖凝胶G-75分子筛柱和肝素亲和柱两步分离纯化,成功从黑尾胡蜂蜂毒中纯化到了1个磷脂酶活性组分.该组分在SDS-PAGE凝胶中表观相对分子质量约为32 000,因此命名为Vtp32.肽指纹图谱分析及N端氨基酸序列比对结果显示Vtp32与Vespa属胡蜂磷脂酶A1(phospholipase A1,PLA1)具有高度的序列相似性.Vtp32可以特异性水解磷脂的sn-1位,因此Vtp32为黑尾胡蜂PLA1.Vtp32水解磷脂可产生溶血性凝脂,导致红细胞裂解.Vtp32可显著延长人血浆的复钙时间,具有抗凝活性.结论 黑尾胡蜂毒液中含有大量的PLA1,可通过葡聚糖凝胶G-75分子筛柱和肝素亲和柱两步分离方法进行纯化.黑尾胡蜂PLA1具有溶血和抗凝活性.
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编辑人员丨2023/8/6
