目的:观察19号染色体开放阅读框5（C19ORF5）调节自噬活性与结直肠癌恶性程度和紫杉醇化疗敏感性的关系。方法:选取哈尔滨医科大学附属第二医院2015—2017年141例结直肠癌患者的肿瘤组织和癌旁正常组织，采用免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应法检测C19ORF5蛋白和mRNA的表达情况，探讨C19ORF5蛋白调节自噬活性与结直肠癌恶性程度的相关性。141例患者均行术后化疗，91例采用常规化疗方案（卡培他滨联合奥沙利铂，常规化疗组），50例采用常规方案联合紫杉醇化疗（紫杉醇组），两组均治疗6个疗程。结果:癌组织在透射电镜下可见自噬体，C19ORF5蛋白为淡黄色至棕褐色颗粒，表达于细胞质；癌组织C19ORF5蛋白染色强度明显强于正常组织，且Ⅱ期染色强度明显高于Ⅳ期。Ⅰ~Ⅱ期患者C19ORF5蛋白高表达率明显高于Ⅲ~Ⅳ期患者[83.3%（25/30）比17.1%（19/111）]，差异有统计学意义（ P<0.01）。癌组织C19ORF5 mRNA表达水平明显高于正常组织（1.17 ± 0.45比0.82 ± 0.29），差异有统计学意义（ P<0.05）。癌组织C19ORF5蛋白表达水平与肿瘤分期、癌胚抗原和肝转移有关（ P<0.01或<0.05），癌组织C19ORF5蛋白表达水平与淋巴结转移无关（ P>0.05）。常规化疗组91例患者中，有效70例（76.9%），无效21例（23.1%）；紫杉醇组50例患者中，有效42例（84.0%），无效8例（16.0%），两组有效率比较差异无统计学意义（ P>0.05）。在常规化疗组中，有效患者和无效患者化疗前癌组织与化疗后血清C19ORF5蛋白表达水平比较差异均无统计学意义（ P>0.05）；有效患者与无效患者化疗后血清C19ORF5蛋白表达水平比较差异无统计学意义（ P>0.05）。在紫杉醇组中，有效患者化疗前癌组织C19ORF5蛋白表达水平明显高于化疗后血清C19ORF5蛋白表达水平（0.9 ± 0.3比0.5 ± 0.2），有效患者化疗后血清C19ORF5蛋白表达水平明显低于无效患者（0.5 ± 0.2比0.8 ± 0.2），差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:C19ORF5蛋白的高表达可以提高结直肠癌组织的自噬活性；C19ORF5蛋白调节自噬活性与结直肠癌的恶性程度呈负相关；C19ORF5蛋白可能通过增强自噬活性提高紫杉醇化疗的敏感性。

目的:通过基因共表达网络筛选与结直肠腺癌(COAD)发展相关的关键基因，并初步验证其潜在功能。方法:从肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库下载COAD患者基因表达谱和临床信息，包括379例COAD患者及39例对照，Kaplan-Meier分析得到COAD预后相关基因后进行权重基因共表达模块(WGCNA)分析；最终获得关键基因后结合分子实验初步验证其功能及潜在机制；多组均数比较采用Kruskal-Wallis检验、两组均数比较采用Mann-whitney U检验，相关性分析使用Pearson检验。 结果:共筛出3 170个预后相关基因；WGCNA构建出9个基因模块，其中Brown模块不仅与COAD呈负相关，且与临床分期、TNM分期呈负相关；Brown模块的中心基因C4orf19在COAD肿瘤组织中表达低于对照组[4.37 (4.10～4.49)比2.70 (2.18～3.18)， U＝684， P<0.01]，并且与临床分期( H＝9.442，)、T分期( H＝9.336)、M分期( U＝5 842)和N分期( U＝14 572)相关( P均<0.05)；免疫组织化学示C4orf19在癌组织组表达低于癌旁组，阳性例数分别为11(27.5%)和35(87.5%)，差异有统计学意义( χ2＝29.460， P<0.01)；沉默C4orf19后，结肠癌细胞增殖(4.494±0.438比3.415±0.453， t＝-4.527)、迁移(15.007±0.439比7.583±0.701， t＝12.69)及侵袭能力(154.000±4.546比96.667±4.643， t＝12.48)高于对照组( P<0.01)。 结论:WGCNA是一种有效的系统生物学方法，通过此方法识别出新的抑癌基因C4orf19。

F-box蛋白广泛存在于真核生物中,主要参与细胞周期调控、凋亡及多种激素信号转导等过程;近几年发现,F-box蛋白还介导了植物对逆境胁迫的应答响应,对维持植物正常生长发育至关重要.干旱等非生物逆境胁迫严重影响了葡萄正常生长发育和果实品质,克隆并分析干旱响应基因对改良葡萄的抗性有重要意义.本研究根据葡萄干旱转录组分析结果,发现11个F-box基因在干旱胁迫下表达量明显上调;其中,VvF-box5基因位于葡萄第19条染色体上,对干旱胁迫的响应明显高于其他F-box成员;VvF-box5基因含有5个外显子和4个内含子,内含子均含有保守的GT… AG序列;VvF-box5基因包含1824 bp的开放阅读框,编码607个氨基酸,氨基酸序列的N端含有1个保守的F-box结构域,C端包含1个FBD和2个LRR结构域.启动子元件分析表明,VvF-box5基因含有多种逆境应答元件,包括GA响应元件GARE-motif、MeJA响应元件CGTCA-motif、干旱胁迫相关元件ERE、HSE和LTR、光应答顺式作用元件ACE、Box4和Sp1以及与细胞周期调节和发育相关的元件等.实时荧光定量PCR结果显示,在干旱、高盐、ABA和MeJA处理下,VvF-box5基因的表达量明显升高;亚细胞定位结果显示,VvF-box5蛋白主要定位于洋葱表皮细胞的细胞核中;VvF-box5的过表达明显提高了转基因拟南芥在干旱处理下的成活率.另外,本研究利用原核表达系统诱导6×His-VvF-box5融合蛋白的表达,并使用蛋白标记亲和层析柱纯化获得了6×His-VvF-box5融合蛋白,为下一步深入研究VvF-box5的功能奠定基础.

目的 探讨19号染色体开放阅读框5(C19ORF5)蛋白在结直肠癌组织中的表达情况,分析C19ORF5蛋白调节自噬活性与结直肠癌恶性程度的关系.方法 收集141例结直肠癌患者的结直肠癌组织和癌旁正常组织,分别采用免疫组织化学染色方法和实时定量聚合酶链反应(PCR)检测两种组织中C19ORF5蛋白和mRNA表达情况,在电镜下观察组织的超微结构,分析C19ORF5蛋白对自噬活性的调节作用,比较不同临床特征结直肠癌患者结直肠癌组织中C19ORF5蛋白的表达情况.结果 结直肠癌组织中C19ORF5蛋白的染色强度明显高于癌旁正常组织,Ⅰ/Ⅱ期结直肠癌组织中C19ORF5蛋白的染色强度明显高于Ⅲ/Ⅳ期结直肠癌组织,Ⅰ/Ⅱ期结直肠癌组织的自噬活性较高,Ⅲ/Ⅳ期结直肠癌组织的自噬活性较低.结直肠癌组织中C19ORF5 mRNA的表达水平明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P﹤0.01).TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、癌胚抗原(CEA)升高、无肝转移结直肠癌患者结直肠癌组织中C19ORF5蛋白的高表达率分别高于TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、CEA正常、有肝转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 在结直肠癌组织中,高表达的C19ORF5蛋白可增加肿瘤细胞的自噬活性,增加基因的稳定性,降低肿瘤的恶性程度.C19ORF5蛋白调节自噬活性与结直肠癌的恶性程度呈负相关,C19ORF5可能是一种重要的抑癌基因.