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中华蜜蜂气味受体基因AcOr10的克隆及表达分析
编辑人员丨2023/8/6
[目的]中华蜜蜂Apis cerana cerana 气味受体Or10 是感受信息素的重要受体蛋白之一.本研究目的是克隆出该受体基因的序列,并分析该基因在雄蜂不同生理状态下触角和大脑中的表达特征,为该基因的功能研究提供理论依据.[方法]采集中华蜜蜂雄蜂触角,提取其总RNA,采用 RT-PCR 技术克隆中华蜜蜂Or10 基因的序列.利用生物信息学软件分析该基因的氨基酸序列.通过荧光定量PCR 技术(qPCR) 分析其在巢门口未性成熟雄蜂、巢门口性成熟雄蜂、巢脾上未性成熟雄蜂、巢脾上性成熟雄蜂触角和大脑中的相对表达量.[结果]克隆到中华蜜蜂Or10 基因(命名为AcOr10) (GenBank 登录号: MF693365) cDNA 序列,长度为914 bp,编码区长738 bp,编码246 个氨基酸,其蛋白质分子量为28. 163 kD,理论等电点为5. 50.系统发育树结果显示,中华蜜蜂 AcOr10 与西方蜜蜂Apis mellifera AmOr10、小蜜蜂Apis florea AfOr4-like 基因聚成一支.荧光定量 PCR 结果表明,巢门口性成熟雄蜂和巢脾上性成熟雄蜂触角中AcOr10 表达量显著高于巢门口未性成熟雄蜂和巢脾上未性成熟雄蜂触角中的表达量(P < 0. 05),但前两者以及后两者之间均差异不显著(P > 0. 05); 巢门口性成熟雄蜂大脑中AcOr10 表达量显著高于巢门口未性成熟雄蜂、巢脾上未性成熟雄蜂和巢脾上性成熟雄蜂大脑中的表达量(P < 0. 05),但后三者之间差异不显著(P > 0. 05); 巢门口未性成熟雄蜂、巢脾上未性成熟雄蜂和巢脾上性成熟雄蜂触角中AcOr10 的表达量都显著高于相同生理状态下大脑中AcOr10 的表达量(P < 0. 05),但巢门口性成熟雄蜂触角和大脑中 AcOr10 的表达量差异不显著(P > 0. 05).[结论]推测AcOr10 与中蜂雄蜂性成熟相关,出巢飞行对触角AcOr10 表达量影响较小,但引起其脑部变化,进而影响雄蜂的交尾行为.
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编辑人员丨2023/8/6
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蜂王上颚腺信息素对雄蜂候选性信息素受体基因表达的影响
编辑人员丨2023/8/5
[目的]性信息素受体(sex pheromone receptors,PRs)是雄蜂感受蜂王上颚腺信息素(queen mandibular pheromone,QMP)的重要受体.本研究分析中华蜜蜂Apis cerana cerana(简称“中蜂”)和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称“意蜂”)雄蜂触角和大脑中候选性信息素受体基因Prs受QMP刺激下的表达特征,为探索蜜蜂气味受体(OR)基因的功能研究提供理论依据.[方法]利用qRT-PCR技术检测分析分别用10 μL QMP[7.04 μg/μL反式-9-氧代-2-癸烯酸(9-ODA)+1.26μg/μL 9-羟基2-癸烯酸(9-HDA) +0.03 μg/μL对羟基苯甲酸甲酯(HOB)]和10 μL 7.04 μg/μL9-ODA处理对飞行状态和爬行状态下的中蜂雄蜂和意蜂雄蜂触角和大脑中4个气味受体基因(Or10,Or11,Or18和Or170)的mRNA表达量的影响.[结果]与空白对照组相比,QMP及9-ODA均能显著下调中蜂雄蜂和意蜂雄蜂触角与大脑中Or11的mRNA表达量;中蜂雄蜂触角中AcOr18和AcOr170基因受QMP及9-ODA刺激后mRNA表达量显著下调;QMP与9-ODA均能显著降低中蜂雄蜂和意蜂雄蜂大脑中Or170的mRNA表达量.在QMP或9-ODA刺激下,飞行中蜂雄蜂大脑中AcOr11的mRNA表达量显著高于爬行中蜂雄蜂大脑中的,而飞行与爬行中蜂雄蜂触角中AcOr11的mRNA表达量没有显著差异.[结论]中蜂和意蜂雄蜂触角与大脑中气味受体基因Or11均能应答蜂王上颚腺信息素9-ODA,且受9-ODA刺激后Or11的mRNA表达下调.
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编辑人员丨2023/8/5