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白桦E-box元件的载体构建及与BplMYB46转录因子的互作分析
编辑人员丨2023/8/6
MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族成员之一,主要参与植物次生代谢调控、激素和环境因子的应答,在植物的生长发育中起着至关重要的作用.已有研究发现,E-box的核心序列为CANNTG(N :A/G/C/T),是一类与光响应和苯丙氨酸生物合成途径相关的元件.在前期研究中,先构建顺式作用元件库,然后以转录因子为中心的酵母单杂交技术筛选发现,白桦的BplMYB46转录因子能够与核心序列为CAAATG 的E-box顺式作用元件结合.但是,是否能与E-box的其他核心序列结合还不清楚.本研究将每一种E-box顺式作用元件的核心序列分别进行双链DNA的复性并连接到pHIS2载体上,然后通过酵母单杂交技术筛选与BplMYB46转录因子能够特异结合的E-box顺式作用元件.结果显示,当E-box的核心序列第3个碱基为A/T/C、第四个碱基为A/G/C时,酵母单菌落能在三缺培养基TDO/3AT上生长,表明与BplMYB46转录因子结合的E-box顺式作用元件的特异性序列为CA(A/T/C)(A/G/C)TG.为后续通过BplMYB46转录因子与E-box顺式作用元件的结合来分析BplMYB46转录因子对下游基因的调控,以及为筛选优良下游基因改良白桦的遗传性状奠定数据基础.
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编辑人员丨2023/8/6
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受脱落酸调节的拟南芥F-box基因的差异表达分析
编辑人员丨2023/8/6
脱落酸(Abscisic acid,ABA)是一种重要的植物激素,在种子休眠的建立、种子萌发、根发育和非生物胁迫反应过程中发挥作用.F-box蛋白是E3泛素连接酶SCF复合体的组成部分,通过特异识别和调节底物蛋白水平而调控植物生长发育过程.通过分析GEO基因芯片,筛选到38个受ABA调节的拟南芥候选F-box基因.选择其中6个F-box基因,进行实时荧光定量PCR分析.研究结果与基因芯片结果基本一致.分析启动子,发现候选基因含有大量ABA、干旱和胁迫相关的顺式作用元件.分析基因表达谱,发现部分基因在保卫细胞、种皮、花粉和衰老叶片中呈现高表达;大部分基因在ABA处理、胁迫和种子吸胀过程中表达量改变显著.这些分析结果为深入研究ABA调节植物生长发育和抗逆的分子机制提供了线索.
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编辑人员丨2023/8/6
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橡胶草TkAPC10基因的鉴定及其表达模式分析
编辑人员丨2023/8/5
APC/C是一类泛素连接酶E3复合体,在调控细胞周期过程中发挥重要作用.为了揭示橡胶草APC/C蛋白复合体的功能,鉴定了橡胶草TkAPC10基因,并对其表达模式进行了分析,初步确定了其功能.TkAPC10基因的ORF为579 bp,编码192个氨基酸,其基因组DNA序列为1092 bp,包含6个外显子和5个内含子.基因组分析发现,TkAPC10以单拷贝的形式存在,其启动子序列除了含有TATA-box和CAAT-box增强子元件外,还有ABA、JA、光以及逆境响应相关的顺式作用元件.系统进化关系分析发现,不同物种的APC10蛋白具有很高的同源性,TKAPC10与莴苣LsAPC10的相似性最高达到99％,而与其他菊科植物的APC10蛋白相似性也达到95％以上.进一步采用qRT-PCR技术对TKAPC10的表达模式进行分析,结果表明,该基因在细胞分裂旺盛的组织(花、叶和根)中的表达量显著高于细胞分裂活动相对缓慢的组织(花梗).外源ABA处理后,TKAPC10基因转录水平显著下降;而MeJA和ET处理后,该基因显著上调表达.经PEG6000以及甘露醇处理后,TKAPC10表达水平显著下降;而高盐胁迫显著诱导该基因的表达.TKAPC10基因参与橡胶草细胞分裂、激素信号以及非生物胁迫响应过程的调控.
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编辑人员丨2023/8/5
