患儿男，3岁8个月，因血白细胞增高3年，右下肢皮肤溃烂1周于2021年7月就诊。患儿2018年7月因发热于外院查血常规示白细胞计数24.7 × 10 9/L，此后定期复查血白细胞计数范围20 × 10 9/L ~ 30 × 10 9/L。2021年5月曾因血白细胞升高至新乡医学院第一附属医院儿科住院2周，其间完善骨髓细胞学检查提示粒系增生不良，淋巴细胞比例增高，红细胞增多。采集患儿及父母静脉血行全外显子基因检测[本研究通过新乡医学院第一附属医院医学伦理委员会批准（批准文号：EC-021-112），患儿父母均签署知情同意书]，患儿X染色体FOXP3基因第4外显子出现c.323 C>T突变，导致108号氨基酸由苏氨酸变为甲硫氨酸（p.Thr108Met），该变异来自母亲（图1）。完善实验室检查：总IgE 317.9 IU/ml（参考值0 ~ 35 IU/ml）。腹部彩超：回肠末段不均匀肿胀、增厚，相应区域肠系膜肿胀、增厚，可见多发肿大淋巴结。肠镜检查：回肠末端黏膜充血、水肿明显，有散在点状发红；降结肠黏膜水肿，局部黏膜可见少许凹陷；回盲部黏膜光滑，血管网清晰。甲状腺彩超未见异常，甲状腺功能检查：游离三碘甲状腺原氨酸2.13 pg/L（参考值2.41 ~ 5.5 pg/L），抗甲状腺过氧化物酶抗体14.47 IU/L（参考值0 ~ 13 IU/L）。追问病史，婴儿期反复出现湿疹，平时无腹痛、便血表现。考虑诊断：X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征（immune dysregulation，polyendocrinopathy，enteropathy，X-linked syndrome，IPEX），嘱定期随访。母亲未见明显异常。

应用调节性T细胞(regulatory T cell，Treg)治疗自身免疫性疾病、移植排斥反应和移植物抗宿主病等疾病的细胞疗法目前正在进行临床试验。Treg细胞的稳定性是应用Treg细胞进行细胞治疗的一个非常关键的问题。叉头转录因子Foxp3在Treg细胞发育和维持过程中起重要的作用，Foxp3的突变可引起Treg细胞的功能障碍。本综述对影响Treg细胞稳定性的各种因素进行探讨，包括Foxp3的转录水平的调控、表观遗传学调控及翻译后修饰的调控，为获得稳定的Treg细胞并更好地应用于相关免疫疾病的治疗提供新思路。

收集并总结1例以糖尿病酮症酸中毒起病，遗传学检测明确为FOXP3突变的男性患儿的临床资料，分析经造血干细胞移植后18个月的随访结果和临床特点。患者男性，3岁5个月龄。5个月龄时因精神萎靡、呕吐症状就诊被诊断为糖尿病酮症酸中毒，继而出现严重腹泻、反复湿疹及肾病综合征，经遗传学检测明确为FOXP3基因突变引起的IPEX综合征。2018年8月于本院血液科行造血干细胞移植，术后随访18个月中，患者自身免疫受损状态得到改善，未再出现新的自身免疫性疾病，其血糖控制情况较移植前明显好转，胰岛素用量明显减少。

目的 探讨急性髓系白血病(AML)病人外周血中CC类趋化因子22(CCL22)、叉头框蛋白P1(FOXP1)表达水平及其预后预测价值.方法 选择2018年5月至2019年5月在孝感市中心医院、华中科技大学医学院附属同济医院及咸宁市中心医院确诊的68例AML病人设为观察组,另取同期健康体检者68例作为对照组,采用酶联免疫法测定外周血CCL22,FOXP1表达水平,分析其与临床特征的关系;采用Pearson法分析AML病人外周血中CCL22,FOXP1表达的相关性;采用Kaplan-Meier生存分析法分析CCL22,FOXP1表达与总体生存时间(OS)的关系;采用Cox比例风险回归模型分析病人预后死亡的影响因素.结果 与对照组相比,观察组CCL22[(600.27±62.89)ng/L比(756.84±100.86)ng/L],FOXP1[(56.02±13.68)ng/L比(103.06±22.16)ng/L]表达均明显升高(t=10.86,14.90,均P<0.05);CCL22,FOXP1表达水平与AML病人年龄、性别、染色体预后、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、FMS样酪氨酸激酶3-内部串联重复基因(FLT3-ITD)、核仁磷酸蛋白基因1(NPM1)突变无关(χ2=0.06～2.95,均P>0.05),与脾肿大、白细胞计数(WBC)有关(χ2=5.90～8.59,均P<0.05);Pearson法分析结果显示,AML病人外周血中CCL22与FOXP1表达呈正相关(r=0.27,P<0.05);Kaplan-Meier法分析结果显示,AML病人外周血CCL22,FOXP1高表达组3年生存率均低于低表达组(47.06％比70.59％,44.12％比73.53％)(χ2=6.50,P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,CCL22,FOXP1是影响AML病人预后的独立危险因素(P<0.05).结论 CCL22,FOXP1在AML病人外周血中呈高表达,CCL22,FOXP1高表达组病人3年生存率均低于低表达组,二者有望成为AML病人预后评估的分子标志物.

目的 探讨浙江籍汉族人群叉头样/翼状螺旋转录因子(Foxp)3基因多态性与CD易感性和疾病表型的关系.方法 纳入2007年1月至2015年12月确诊的268例CD患者和490名健康对照者,采用多重SNaPshot技术检测其Foxp3的rs3761547、rs2232365、rs2294021、rs3761548 4种单核苷酸多态性(SNP),评价其与英夫利西单克隆抗体疗效的关系,并进行连锁不平衡和单倍型分析.统计学方法采用非条件Logistic回归分析.结果 31例接受英夫利西单克隆抗体治疗有效与19例无效患者比较,4个SNP的突变等位基因和基因型频率差异均无统计学意义(P均＞0.05).连锁不平衡分析发现上述4个SNP彼此紧密连锁.男性CD组GCGC单倍型频率为29.20％(40/137),高于男性健康对照组的19.37％(43/222),差异有统计学意义(OR=1.717,95％CI 1.045～2.820,P=0.032);女性CD组ACGA单倍型频率为13.36％(35/262),低于女性健康对照组的19.03％(102/536),差异有统计学意义(OR=0.656,95％CI 0.433～0.995,P=0.046).男性结肠型(L2) ATAC单倍型频率为25.93％(7/27),低于回结肠型(L3)的75.38％(49/65),差异有统计学意义(OR=0.114,95％CI 0.041～0.320,P＜0.01);男性结肠型(L2)GCGC单倍型频率为51.85％(14/27),高于回结肠型(L3)的9.23％(6/65),差异有统计学意义(OR=10.590,95％CI3.423～32.758,P＜0.01);男性狭窄型(B2)患者ATAC单倍型频率为73.21％(41/56),高于非狭窄、非穿透型(B1)的47.30％(35/74),差异有统计学意义(OR=0.328,95％CI 0.156～0.693,P=0.003);男性狭窄型(B2)患者GCGC单倍型频率为17.86％(10/56),低于非狭窄、非穿透型(B1)的39.19％(29/74),差异有统计学意义(OR=2.946,95％CI 1.295～6.784,P=0.009);男性穿透型(B3)患者ACGA单倍型频率为71.43％(5/7),高于非狭窄、非穿透型(B1)的12.16％(9/74),差异有统计学意义(OR=0.055,95％CI 0.009～0.329,P＜0.01).结论 Foxp3(rs3761547、rs2232365、rs2294021、rs3761548)基因多态性与中国汉族CD易感性和疾病表型相关,但与英夫利西单克隆抗体的疗效无关.

为了考察蛋白质中定点引入对硝基苯丙氨酸后对T细胞分化的影响,以人表皮生长因子受体2(HER2)胞外区为模型分子,利用实验室前期构建的工程菌表达了定点引入对硝基苯丙氨酸的HER2突变体.用含对硝基苯丙氨酸的HER2突变体免疫小鼠,分析其对小鼠T细胞亚群分化的影响.研究结果显示,对硝基苯丙氨酸的引入显著增强了HER2的免疫原性,免疫5周后,突变体免疫组的小鼠体内抗HER2抗体滴度明显高于PBS组和原型免疫组的小鼠;流式细胞术检测结果显示,小鼠淋巴结内Tfh细胞比例从4％上升至8％,而Treg细胞比例从5％下降至1％;QT-PCR分析结果显示,Tfh细胞关键转录因子Bcl-6的mRNA水平提高了2倍,而Treg细胞关键转录因子FOXP3的mRNA水平明显降低;ELISA法检测血清中Tfh细胞效应因子IL-21的含量从4 pg/mL上升至28 pg/mL.上述研究结果证实,含有对硝基苯丙氨酸的HER2突变体可以通过激活Tfh细胞分化而引起高效免疫应答.

在正常机体内,人类胸腺淋巴细胞经过机体筛选后,潜在致病性的自身反应性淋巴细胞会被清除,但是由于胸腺阴性选择的存在,潜在致病性的自身反应性淋巴细胞不会完全被消除,未被消除的自身反应性淋巴细胞出现在外周血中,机体为了防止外周的潜在有害的自身反应发生,通过发挥多种机制包括克隆缺失,克隆无反应性和抑制性T细胞(调节性T细胞)的主动抑制来实现外周耐受[1].人体内CD4+和CD8+T细胞以及B细胞的多个细胞亚群具有免疫调节特性,为调节性T细胞或调节性B细胞.调节性细胞的发展或功能的破坏是人类和动物中自身免疫和炎症疾病的主要原因[2].目前研究比较明确的调节性T细胞为CD4+CD25+FOXP3+ T(CD4+调节性T细胞),发现小鼠体内缺失该调节细胞会患自身免疫病,此外,人类FOXP3+基因突变后,会有严重的自身免疫病、过敏和免疫病理学的发生[3].在此基础上越来越多的研究发现CD8+调节性T细胞在维持自身免疫性疾病方面至关重要.本文就10年来国内外对CD8+调节性T细胞研究的成果或进展加以总结.

本文旨在探讨微小RNA-498 (miR-498)影响类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单核细胞(peripheralblood mononuclear cells,PBMCs)中Th17细胞分化的作用机制.从50例RA患者和50例对照人群中分别收集外周血,分离PBMCs.流式细胞术检测CD4+IL-17+T(Th17)细胞或者CD4+ FOXP3+T(Treg)细胞比例,并分析Th 17/Treg比值.Real-time PCR检测细胞中miR-498和STAT3基因表达,Western blot检测STAT3的蛋白表达,ELISA检测外周血血清或细胞上清中IL-17的浓度.荧光素酶报告基因实验验证miR-498靶向结合STAT3的3'非翻译(3'untranslated region,3'UTR).miR-498 mimic或/和pcDNA-STAT3瞬时转染CD4+T细胞,进一步考察miR-498影响Th17细胞分化的机制.结果显示,RA患者的PBMCs中,Th17细胞比例显著高于对照,且Th 17/Treg比值也显著高于对照(P＜0.05).miR-498低表达而STAT3高表达于RA患者的PBMCs中,且RA患者血清中的IL-17浓度显著高于对照(P＜0.05).在转染野生型STAT3报告基因质粒的细胞中转染miR-498 mimic/inhibitor后,荧光酶活性、STAT3的基因和蛋白表达均明显改变(P＜0.05),但是在转染突变型STAT3报告基因质粒的细胞中转染miR-498 mimic/inhibitor,上述指标没有显著变化(P＞0.05).此外,miR-498 mimic转染CD4+ T细胞后,显著降低Th17细胞比例,且细胞分泌IL-17的水平减少(P＜0.05),而与pcDNA-STAT3共转CD4+T细胞后,Th17细胞比例明显提高,细胞分泌IL-17的水平增加(P＜0.05).以上结果提示,在RA患者CD4+T细胞中,过表达miR-498靶向下调STAT3,进而抑制Th17细胞分化.

胃肠间质瘤(GIST)是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤,多数GIST发病机制是c-Kit基因发生功能获得性突变,表达Kit蛋白并持续激活其下游信号通路使肿瘤细胞持续增殖.作为酪氨酸激酶抑制剂,伊马替尼在GIST中的应用使得靶向治疗成为手术治疗以外最为重要的治疗方式,已深刻影响了GIST的治疗模式.Foxp3+Treg是体内重要的调节性T细胞,通过抑制CTL、NK细胞等肿瘤抑制细胞的功能,负向调节机体的抗肿瘤免疫反应.研究显示,伊马替尼不仅可通过靶向治疗机制,也可能通过抑制Foxp3+Treg细胞而增强机体对肿瘤的免疫反应,从免疫途径发挥治疗GIST的作用.笔者就伊马替尼对GIST患者外周血中Foxp3+Treg细胞及其亚群影响的相关研究作一综述.

目的 分析两例X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征(immune dysregulation,polyendocrinopathy,enteropathy,X-linked,IPEX综合征)患儿的临床特点及FOXP3基因的突变类型.方法 收集患儿的临床资料,抽提患儿及其父母的外周血DNA,对FOXP3基因进行测序,对新发现的突变位点以100名无亲缘关系的健康儿童为对照进行验证,并用生物信息学软件对突变的进行功能预测.结果 两例患儿均于新生儿期起病,表现为高血糖、腹泻、湿疹、营养不良,反复感染致症状加重,其家长放弃治疗.两例患儿分别于6月龄和2月龄死亡.患儿1基因检测结果示FOXP3基因存在第9内含子c.967+3A＞T剪切突变(患儿为半合子,母亲为杂合子,父亲为野生型),该突变既往未见报道.患儿2基因检测结果提示FOXP3基因第11外显子c.1150G＞A错义突变(患儿为半合子,母亲携带杂合错义突变,父亲为野生型).对100名对照进行FOXP3基因c.967+3A＞T剪切位点测序,未发现相同的突变.Human SplicingFinder软件预测c.967+3A＞T可影响mRNA的剪接,从而影响蛋白质的功能.结论 两例患儿均有较为典型IPEX综合征的临床表现,且经基因分析明确了诊断.IPEX综合征起病早,临床表现多样,死亡率高.对于新生儿糖尿病的患儿,建议尽早进行基因检测,以明确诊断.