目的:明确3个Leber先天性黑矇（LCA）家系的致病基因突变，初步分析其基因型和临床表型的关系。方法:回顾性研究。2021年1~12月于宁夏回族自治区人民医院眼科检查确诊的4例LCA患者和7名家系成员纳入研究。4例患者来自3个无血缘关系家系。详细收集患者及家系成员临床资料。采集患者及家系成员外周静脉血，提取全基因组DNA。应用全基因组外显子测序技术进行致病基因突变检测，对可疑致病突变位点通过Sanger测序进行验证，通过蛋白质预测软件和保守性分析确定致病基因的突变位点，结合家系图与先证者进行共分离分析。结果:4例患者中，男性1例，女性3例；年龄4~18岁。眼球震颤3例；指压眼征伴夜视力差1例；全视野视网膜电图重度下降4例。所有患眼黄斑中心凹反光可见，周边视网膜未见明显异常。黄斑区椭圆体带隆起强反射信号1只眼；视网膜层间隐约可见弱反射信号2只眼；血管分支增多、周边视网膜无灌注区伴毛细血管渗漏1只眼；黄斑区环状强自身荧光4只眼。家系成员表型未见明显异常。基因检测结果显示，家系1先证者（Ⅱ-1）携带 PRPH2基因c.640T> A（p.C214S）（M1）纯合突变；家系2先证者（Ⅱ-2）携带 TULP1基因c.1256G>A（p.R419Q）（M2）、c.1A>C（p.M1L）（M3）复合杂合突变；家系3先证者（Ⅱ-1）及其妹妹（Ⅱ-2）携带 GUCY2D基因c.1943T>C（p.L648P）（M4）、c.380C>T（p.P127L）（M5）复合杂合突变。家系2先证者父母、姐姐（Ⅱ-1）及家系3先证者父母均为相应杂合变异携带者。其中，M1、M3、M4、M5为新发现突变。家系内基因型和疾病表型呈共分离。根据系谱及基因检测结果分析，3个家系均为常染色体隐性遗传。氨基酸保守性分析发现，M1、M2、M3、M4、M5在物种间具有高度保守性。生物信息学分析结果均为致病性变异。 结论:发现并证实 PRPH2基因M1、 TULP1基因M3和 GUCY2D基因M4、M5为LCA的新发现突变位点，扩大了LCA的突变位点和基因突变频谱；LCA具有发病年龄小、眼底表现各异及视力损害严重等特点。

背景 遗传性视网膜疾病(HRDs)是以原发性视网膜病变为主要病理改变、视力和色觉等视敏度严重损害为主要临床表现的致盲眼病,其与遗传因素密切相关,是临床上难治性盲的首要原因. 目的 应用目标基因捕获结合二代测序技术检测HRDs的致病基因. 方法 选择2014年1月至2015年1月在宁夏眼科医院就诊的无遗传性眼病家族史的20例HRDs患者作为研究对象.收集所有患者及其家庭成员临床资料,完善眼科检查,抽取患者和家庭正常成员外周静脉血,提取DNA.针对232个HRDs已知致病基因的目标序列设计并定制目标序列捕获芯片,借助高通量二代测序技术检测患者的遗传变异,数据经分析滤过,候选突变进行Sanger测序验证和致病性评估,明确致病基因和突变,并对表型和基因型间的关系进行分析.结果 20例HRDs患者中有11例患者检测到致病性突变位点,共涉及9个基因,阳性率为55％.其中有8例患者检测到复合杂合突变,3例患者为纯合子突变,均为新发现的突变位点.通过对家系成员的基因筛查分析,6例HRDs患者为常染色体隐性遗传,5例遗传类型不确定.结合临床表型以及基因检测结果分析,11例HRDs患者的诊断分别为锥杆细胞营养不良5例,致病基因分别为ABCA4、RPE65、USH2A、RIMS1和RHO;Leber先天性黑曚3例,致病基因分别为CRB1(2例)和LCA5;先天性静止性夜盲l例,致病基因为PRPF3;Best卵黄样黄斑营养不良1例,致病基因为BEST1基因;Stargardt病1例,致病基因为ABCA4基因. 结论 目标基因捕获结合二代测序技术可以对视网膜疾病患者进行快速、有效的基因诊断,结合临床特征分析有助于提高隐性遗传及遗传方式不明的HRDs的临床诊断水平.