Mg2+依赖性蛋白磷酸酶1δ(protein phosphatase magnesium-dependent 1δ,PPM1D)作为肝癌潜在的预后标志物和治疗靶点,其致癌机制和预后价值仍未完全阐明.为了全面认识PPM1D,使用生物信息学方法,对PPM1D蛋白的序列同源性、组织表达、亚细胞定位、理化性质、 空间结构及蛋白质相互作用网络进行分析.结果表明:人PPM1D基因编码605个氨基酸组成的多肽,与物种进化程度一致,属于PP2C蛋白超家族,是碱性不稳定的亲水蛋白,无信号肽和跨膜区域;PPM1D蛋白主要定位于细胞核内,其主要二级结构为随机卷曲,存在磷酸化、乙酰化、甲基化和泛素化位点,与PPM1D相互作用的蛋白主要是细胞周期检查点蛋白和细胞损伤修复相关蛋白.根据分析结果阐述了PPM1D蛋白与癌症的相关性以及PPM1D蛋白作为癌症标志物的理论基础,为进一步研究该蛋白及其参与的信号通路提供一定的借鉴和参考.

目的 探讨细胞膜半通道蛋白Pannexin-1对肺损伤小鼠肺组织P2X7受体活化及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)介导的炎症反应的调控作用.方法 将60只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、机械通气(MV)组、MV+低剂量脂多糖(LPS)组(MLL组)、MV+中高剂量LPS组(MML组)和MV+高剂量LPS组(MHL组),每组12只.应用大潮气量MV联合气道内注射LPS的方法制备小鼠双重打击肺损伤模型.所有小鼠均行气管切开插管,Sham组小鼠保持自主呼吸,其余4组均给予?28?mL/kg大潮气量MV.小鼠呼吸稳定后,Sham组和MV组经气道内注入生理盐水(NS)8?mL/kg,MLL组、MML组及MHL组分别给予2、5、8?mg/kg的LPS(以NS稀释成8?mL/kg).MV?4?h后处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定细胞内外ATP浓度.取肺组织,测定肺含水率;苏木素-伊红(HE)染色后观察肺组织病理学改变,并进行肺损伤评分;采用免疫组化法观察肺组织中Pannexin-1的表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western?Blot)及荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肺组织中Pannexin-1、P2X7受体、caspase-1和白细胞介素-1β(IL-1β)的蛋白与mRNA表达.结果 Sham组小鼠肺组织无明显病理学改变;细胞内ATP浓度高于细胞外;肺组织含水率较低;免疫组化显示,肺组织中Pannexin-1呈低表达;且肺组织中Pannexin-1、P2X7受体、caspase-1及IL-1β均仅有微量蛋白或mRNA表达.与Sham组小鼠相比,MV组小鼠部分肺泡破损,渗出不明显,肺损伤评分略有升高;细胞内外ATP浓度无明显波动;肺组织含水率明显升高;肺组织中Pannexin-1、P2X7受体、caspase-1及IL-1β的表达略有升高.给予LPS干预后,小鼠肺组织渗出逐渐增多,肺泡破裂,肺泡壁毛细血管扩张,有炎性细胞趋化,肺损伤评分明显升高,但3个剂量组间无明显差异;随LPS剂量升高,小鼠BALF中细胞外ATP浓度呈递增趋势,细胞内ATP浓度呈递减趋势,肺组织含水率逐渐增高,肺组织中Pannexin-1、P2X7受体、caspase-1及IL-1β的蛋白和mRNA表达逐渐升高,均呈一定剂量依赖性.MHL组各项指标与MV组比较差异均有统计学意义〔肺损伤评分(分):8.25±0.45比3.50±0.52 ;细胞内ATP浓度(μmol/L):198.76±150.77比896.69±281.11,细胞外ATP浓度(μmol/L):336.57±90.28比141.52±42.22;肺组织含水率:(6.37±0.11)%比(5.05±0.14)% ;Pannexin-1蛋白(灰度值):3.20±0.70比1.54±0.76,Pannexin-1??mRNA(2-ΔΔCT):7.86±0.86比2.47±0.92;P2X7受体蛋白(灰度值):3.18±0.88比1.80±0.72,P2X7受体mRNA (2-ΔΔCT):7.17±0.96比2.31±0.45;caspase-1蛋白(灰度值):3.00±0.45比0.93±0.51,caspase-1?mRNA(2-ΔΔCT):?4.39±0.91比2.74±0.41;IL-1β蛋白(灰度值):2.54±1.08比1.16±0.53,IL-1β?mRNA(2-ΔΔCT):132.34±41.48?比19.67±8.67,均P＜0.05〕.结论 Pannexin-1在MV联合LPS诱导的肺损伤中,可能通过调节ATP由胞内释放到胞外,与细胞表面的P2X7受体结合,从而调控有活性的caspase-1生成和释放,参与IL-1β等炎性因子的生成,最终导致肺损伤的发生发展.

目的 探讨外周血中性粒细胞Mg2+-依赖性蛋白磷酸酶1δ(Wip)在颅脑术后颅内感染早期诊断中的价值.方法 选取2016年1月至2018年12月收治的颅脑术后颅内感染32例作为观察组,无感染61例作为对照组.术前1d、术后1d检测血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)及外周血中性粒细胞Wip1阳性率.结果 术后1d,观察组血清PCT、CRP、IL-6及TNF-α较术前均明显上升(P＜0.01),而且血清PCT和IL-6明显高于对照组(P＜0.01).术后1d,观察组外周血中性粒细胞Wip1阳性率[(4.33±0.32)％]明显低于对照组[(13.99±0.77)％;P＜0.01].观察组中性粒细胞Wip1阳性率与血清IL-6(r=-0.6419,P＜0.01)和血清PCT(r=-0.6431,P＜0.01)均呈显著负相关.ROC曲线分析结果显示,Wip1、PCT及IL-6早期诊断术后颅内感染的曲线下面积分别为0.9495(95％CI 0.9064～0.9927;P＜0.01)、0.9385(95％CI 0.8756～0.9936;P＜0.01)、0.8947(95％ CI 0.8036～0.9858;P＜0.01).结论 外周血中性粒细胞Wip1阳性率降低与颅脑术后颅内感染发生有关,可能是早期诊断的指标.