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长链非编码RNA 1010001N08Rik和GATA6在高氧暴露小鼠肺癌细胞中表达和意义
编辑人员丨6天前
目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)1010001N08Rik和GATA6在高氧暴露小鼠肺癌细胞(Lewis lung carcinoma cell,LLC细胞)中表达量的变化与相关性,及其介导Wnt/β-catenin信号通路参与高氧肺损伤的机制.方法:(1)将LLC细胞分为空气组、高氧暴露24 h组和高氧暴露48h组,应用RT-PCR和Western blot法分别检测lncRNA1010001N08Rik、GATA6、Wnt及β-catenin的mRNA及相关蛋白表达水平.(2)将LLC细胞分为无干扰空气组、无干扰高氧组、NC-siRNA干扰高氧组、siRNA 干扰高氧组.应用 RT-PCR 和 Western blot 法分别检测 lncRNA1010001N08Rik、GATA6、Wnt 及 β-catenin 的 mRNA及相关蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡.(3)利用GraphPadPrism 9.4.1进行数据可视化.(4)采用SPSS 26.0统计软件进行数据处理,两组间数据比较采用两独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析.(5)将Wnt、Fzd2、GATA6等相关基因输入string11.0数据库构建PPI网络并导出PPI网络图.结果:(1)与空气组相比较,高氧暴露24h组和48h组GATA6的mRNA表达量下降,lncRNA1010001N08Rik、Wnt、β-catenin的mRNA表达量增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).(2)与空气组相比,高氧暴露24h组和48h组GATA6蛋白表达量下降,Wnt、β-catenin蛋白表达量增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).(3)与无干扰空气组相比,无干扰高氧组、NC-siRNA干扰高氧组的GATA6的mRNA表达量和蛋白表达量下降,1010001N08Rik的mRNA表达量、Wnt、β-catenin的mRNA表达量和蛋白表达量增加;无干扰高氧组与NC-siRNA干扰高氧组的比较差异无统计学意义;与干扰高氧组与NC-siRNA干扰高氧组相比,siRNA干扰高氧组GATA6的mRNA表达量和蛋白表达量增加,1010001N08Rik的mRNA表达量、Wnt、β-catenin的mRNA表达量和蛋白表达量下降,差异均具有统计学意义(P＜0.05).(4)与无干扰空气组相比,无干扰高氧组、NC-siRNA干扰高氧组细胞凋亡率增加;无干扰高氧组与NC-siRNA干扰高氧组的比较差异无统计学意义;与无干扰高氧组与NC-siRNA干扰高氧组相比,siRNA干扰高氧组的细胞凋亡率下降,差异均具有统计学意义(P＜0.05).(5)根据string11.0数据库导出Wnt、Fzd2、GATA6等相关基因的PPI网络图显示,GATA6与Wnt有密切相关.结论:高氧暴露下,LCC细胞中lncRNA1010001N08Rik可能通过下调GATA6的表达激活Wnt/β-catenin信号通路的传导,从而促进高氧肺损伤的形成过程.
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编辑人员丨6天前
