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目的 探讨转染髓样细胞白血病( Mcl-1 ) siRNA特异性沉默Mcl-1 基因对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体( TRAIL)诱导胃癌细胞HGC-27 凋亡的影响. 方法 采用碘化丙啶( PI)染色法流式细胞术分析TRAIL单独作用的细胞凋亡率以及广谱caspase抑制剂z-VAD-fmk对细胞凋亡的抑制作用;Western blot法分析TRAIL处理前后半胱天冬酶-3(caspase-3)和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)的活化以及抗凋亡的Bcl-2、Bcl-XL 及Mcl-1的蛋白表达情况;采用Lipofectamine 2000 转染 Mcl-1 siRNA 入 HGC-27 细胞, Western blot 法验证基因沉默效果,流式细胞术分析转染后细胞凋亡率的变化. 结果 HGC-27细胞对TRAIL不敏感, 48 h的凋亡率仅为( 20. 65 ± 3. 23 )

作者:金玮;吴萍

来源:安徽医科大学学报 2016 年 51卷 1期

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作者:
金玮;吴萍
来源:
安徽医科大学学报 2016 年 51卷 1期
标签:
胃癌 细胞凋亡 小干扰RNA Mcl-1 gastric cancer apoptosis siRNA Mcl-1
目的 探讨转染髓样细胞白血病( Mcl-1 ) siRNA特异性沉默Mcl-1 基因对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体( TRAIL)诱导胃癌细胞HGC-27 凋亡的影响. 方法 采用碘化丙啶( PI)染色法流式细胞术分析TRAIL单独作用的细胞凋亡率以及广谱caspase抑制剂z-VAD-fmk对细胞凋亡的抑制作用;Western blot法分析TRAIL处理前后半胱天冬酶-3(caspase-3)和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)的活化以及抗凋亡的Bcl-2、Bcl-XL 及Mcl-1的蛋白表达情况;采用Lipofectamine 2000 转染 Mcl-1 siRNA 入 HGC-27 细胞, Western blot 法验证基因沉默效果,流式细胞术分析转染后细胞凋亡率的变化. 结果 HGC-27细胞对TRAIL不敏感, 48 h的凋亡率仅为( 20. 65 ± 3. 23 )

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