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目的 观察miRNA在人骨髓白血病干细胞中的表达情况.方法 以从人骨髓中分离培养的骨髓白血病干细胞为实验对象,用MirVaNa试剂盒分离提取细胞内小RNA.用Agilent 2100分析仪分析其完整性和含量.用Agilent人miRNA V12芯片分析miRNA的表达.结果 复苏后存活的单核细胞经流式分选出的白血病干细胞群比例为1.58%,细胞数为2.5×105个.分选出的白血病干细胞抽提得到3 μg的总RNA.利用安捷伦miRNA芯片一共检测到81个人源miRNA的表达.其中,表达量最高的10个miRNA分别是miR-233、miR-21、miR-142、miR-720、miR-23a、let-7f、let-7a、miR-16、miR-15a和miR-19b.利用TargetScan软件,预测这10个表达量最丰富的miRNA共有2 147个靶标基因.初步进行功能富集分析,发现这些miRNA所调控的基因主要集中在转录调控、生物合成、跨膜运输、免疫系统发育、淋巴系和髓系细胞分化等方面.结论 筛选出了在人骨髓白血病干细胞中表达的miRNA,为其参与调控白血病干细胞的增殖分化提供了依据,同时为miRNA在白血病干细胞中潜在应用奠定基础.

作者:耿其荣;文海军;陈晓勤;王华;王亮;王维达;吕跃

来源:广东医学 2014 年 35卷 20期

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作者:
耿其荣;文海军;陈晓勤;王华;王亮;王维达;吕跃
来源:
广东医学 2014 年 35卷 20期
标签:
miRNA 急性髓系白血病 白血病干细胞 microRNAs acute myeloid leukemia leukemic stem cells
目的 观察miRNA在人骨髓白血病干细胞中的表达情况.方法 以从人骨髓中分离培养的骨髓白血病干细胞为实验对象,用MirVaNa试剂盒分离提取细胞内小RNA.用Agilent 2100分析仪分析其完整性和含量.用Agilent人miRNA V12芯片分析miRNA的表达.结果 复苏后存活的单核细胞经流式分选出的白血病干细胞群比例为1.58%,细胞数为2.5×105个.分选出的白血病干细胞抽提得到3 μg的总RNA.利用安捷伦miRNA芯片一共检测到81个人源miRNA的表达.其中,表达量最高的10个miRNA分别是miR-233、miR-21、miR-142、miR-720、miR-23a、let-7f、let-7a、miR-16、miR-15a和miR-19b.利用TargetScan软件,预测这10个表达量最丰富的miRNA共有2 147个靶标基因.初步进行功能富集分析,发现这些miRNA所调控的基因主要集中在转录调控、生物合成、跨膜运输、免疫系统发育、淋巴系和髓系细胞分化等方面.结论 筛选出了在人骨髓白血病干细胞中表达的miRNA,为其参与调控白血病干细胞的增殖分化提供了依据,同时为miRNA在白血病干细胞中潜在应用奠定基础.

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