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目的构建分泌性表达结核分枝杆菌抗原蛋白ESAT-6的重组卡介苗.方法分别以卡介苗(BCG)和结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到约117bp的BC Gα抗原(α-Ag)信号肽序列和285bp的结核杆菌esat-6基因序列.将esat-6基因与大肠杆菌-卡介苗穿梭质粒载体pMV261重组,得到重组质粒pME.再将BCG α-Ag信号肽序列克隆至pME中,得到重组质粒pSME.结果质粒pSME用双酶切和PCR扩增鉴定证实,克隆基因α-Ag信号肽序列和esat-6 正确插入载体pMV261.结论重组质粒pSME可望在BCG中分泌性表达结核分枝杆菌的免疫保护性抗原蛋白ESAT-6,该质粒的构建成功为改造卡介苗、发展新型结核病疫苗奠定了基础.
作者:陈玮;鲍朗;谢勇恩;胡昌华;张万江;李学敏;张会东
来源:华西医科大学学报 2002 年 33卷 1期
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