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目的 探讨骨髓间质干细胞(BMSCs)的体外标记和体内示踪技术.方法 分离培养并鉴定大鼠BMSCs,进行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记后,体外培养被标记的BMSCs,观察其连续传代后的BrdU可标记时间和标记效率;建立大鼠胃黏膜损伤模型,将分离纯化的BrdU标记BMSCs移植到损伤的胃黏膜下,体内观察BrdU对活体移植BMSCs的示踪作用.结果 免疫组化显示体外培养大鼠BMSCs的CD44、CD90表达阳性,CD14、CD45表达阴性,显微结构表现出于细胞特征.进行BrdU标记后,标记阳性率随标记时间延长而增高,48 h达高峰,72 h仍维持高阳性率.终浓度为10 μmol/L的BrdU孵育48 h、72 h阳性标记率高于5μmol/L BrdU组(P<0.05),但与15 μmol/L BrdU组阳性标记率差异无统计学意义(P>0.05),并且连续传代培养21d后也可检测到.BrdU可示踪BMSCs在损伤的胃黏膜下局部定植.结论 BrdU在浓度为10 μmol/L、标记时间48 h至72h标记效率较高;BrdU标记可用于一定时间段内BMSCs移植入体内后定植和生长的动态示踪观察方法.

作者:张明鸣;贾贵清;程惊秋;杨平;陆燕蓉;伍晓汀

来源:四川大学学报(医学版) 2012 年 2期

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作者:
张明鸣;贾贵清;程惊秋;杨平;陆燕蓉;伍晓汀
来源:
四川大学学报(医学版) 2012 年 2期
标签:
5-溴脱氧尿嘧啶核苷 骨髓间质干细胞 细胞培养
目的 探讨骨髓间质干细胞(BMSCs)的体外标记和体内示踪技术.方法 分离培养并鉴定大鼠BMSCs,进行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记后,体外培养被标记的BMSCs,观察其连续传代后的BrdU可标记时间和标记效率;建立大鼠胃黏膜损伤模型,将分离纯化的BrdU标记BMSCs移植到损伤的胃黏膜下,体内观察BrdU对活体移植BMSCs的示踪作用.结果 免疫组化显示体外培养大鼠BMSCs的CD44、CD90表达阳性,CD14、CD45表达阴性,显微结构表现出于细胞特征.进行BrdU标记后,标记阳性率随标记时间延长而增高,48 h达高峰,72 h仍维持高阳性率.终浓度为10 μmol/L的BrdU孵育48 h、72 h阳性标记率高于5μmol/L BrdU组(P<0.05),但与15 μmol/L BrdU组阳性标记率差异无统计学意义(P>0.05),并且连续传代培养21d后也可检测到.BrdU可示踪BMSCs在损伤的胃黏膜下局部定植.结论 BrdU在浓度为10 μmol/L、标记时间48 h至72h标记效率较高;BrdU标记可用于一定时间段内BMSCs移植入体内后定植和生长的动态示踪观察方法.

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