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目的 用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记家兔皮肤成纤维细胞,确定最佳标记方法,探讨其作为成纤维细胞示踪方法的可行性.方法 取12-16周龄健康中国大耳白兔颈部皮肤,胶原酶消化,分离并培养成纤维细胞.取第3代细胞,加入终浓度分别为2.5、5、10和15μg/ml的BrdU共培养,MTT法检测细胞的生长情况.分别用2.5、5、10和15μg/ml的BrdU标记第3代细胞,标记6、12、24和48 h后,采用免疫荧光法检测各组细胞的标记阳性率.以最佳剂量及时间标记家兔成纤维细胞,与壳聚糖-甘油磷酸钠水凝胶混合后,注入兔颈内动脉,1周后,免疫荧光法观察植入细胞.结果 加入BrdU 48 h内,各浓度的BrdU对家兔成纤维细胞生长的影响均不明显.标记剂量及标记时间均可影响标记率,但标记时间的影响更大.5 μg/ml剂量标记24 h,标记率可达(94.50±2.08)
作者：甄勇；许侃；罗祺；陈学思；赵长稳；王柏；张德智
来源：中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 4期
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