目的 构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)Rv3432c基因的原核表达质粒并进行体外表达,运用生物学信息学软件分析蛋白Rv3432c特征,探讨抗M.tb新型药物靶点.方法 以灭活的结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR法扩增Rv3432c基因,并与表达载体pET-28a构建原核表达重组质粒.SDS-PAGE分析表达产物并利用亲和层析的方法进行纯化.采用Protparam、Pfam online tool、SOMPA、Protscale、TMHMM、Signalp 6.0、NetPhos3.1、SUMOsp 2.0、SWISS-MODEL等生物信息学软件分析蛋白Rv3432c的生物学特性.结果 pET-28a-Rv3432c重组质粒测序结果与目的基因完全一致;SDS-PAGE分析表明,该融合蛋白以可溶性蛋白形式存在,相对分子质量约为55×103,与预期大小相符.蛋白Rv3432c为亲水性蛋白(GRAVY值为-0.079).蛋白Rv3432c为无跨膜结构域和信号肽的蛋白.Rv3432c二级结构主要由无规则卷曲(39.78
作者：易海波；高兴红；罗果；徐鹏；王欢
来源：四川大学学报（医学版） 2024 年 55卷 2期
