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目的 构建及鉴定含有GST标签的结核分枝杆菌pncA基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中高效表达融合蛋白.方法 PCR扩增结核杆菌pncA基因,并构建到pGEX4T-1上.重组质粒经测序鉴定后进行诱导表达.采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析重组蛋白.结果 与预期大小相似,PCR扩增出大约600 bp的pncA基因,并且吡嗪酰胺酶(PZase)在诱导后得以高效表达.结论 构建了质粒载体pGEX4T-1-pncA,并经诱导后高效表达了PZase融合蛋白,为进一步研究吡嗪酰胺(PZA)耐药性奠定了基础.
作者：石洁；马晓光；李辉；闫国蕊；邢进；郝宝林
来源：现代预防医学 2014 年 41卷 3期
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