背景 慢性炎症环境下人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)生物学功能受损是牙周炎患者组织再生治疗困难的关键原因.作为非经典Wnt/Ca2+信号通路的分泌型配体,Wnt5a在干细胞生长发育及炎症性疾病中发挥着关键作用,但炎症微环境下Wnt5a对hPDLSCs增殖和成骨分化的影响尚不明确.目的 探讨炎症微环境下过表达Wnt5a对人牙周膜干细胞增殖及成骨分化能力的影响.方法 收集健康离体牙,参照酶消化法分离培养原代hPDLSCs.使用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激hPDLSCs,构建体外炎症微环境.按照阴性对照组、过表达组、TNF-α +阴性对照组、TNF-α +过表达组进行实验分组.成骨诱导条件下实时定量PCR检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、TNF-α、成骨关键基因Runt相关转录因子 2(recombinant runt related transcription factor 2,RUNX2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原(collagen-1,COL-1)和Wnt5a信号分子的mRNA表达变化;利用慢病毒转染技术获取过表达Wnt5a的hPDLSCs;CCK-8 法测定Wnt5a对hPDLSCs增殖的影响;成骨诱导培养后,ALP染色、茜素红S(alizarin red S,ARS)染色用于评价过表达Wnt5a对hPDLSCs成骨分化能力的影响,实时定量PCR和Wes

作者：张璇；王辰；杨琳；段霏；杨燕美；顾斌

来源：解放军医学院学报 2023 年 44卷 9期