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[目的]揭示二斑叶螨Tetranychus urticae对螺螨酯的分子抗性机理.[方法]利用RT-PCR克隆了二斑叶螨的谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因cDNA全长序列,采用生物信息学软件分析了克隆基因的编码蛋白特性;利用实时荧光定量PCR方法分析GST基因在二斑叶螨的螺螨酯抗性与敏感品系中的表达差异.[结果]克隆获得的谷胱甘肽-S-转移酶2个基因分别被命名为TuGSTd1和TuGSTd2(GenBank登录号分别为:KC445659和KC445660).序列分析发现,TuGSTd1的开放阅读框长度为648 bp,编码215个氨基酸,分子量约为24.47 kDa,理论等电点为5.49; TuGSTd2的开放阅读框为648 bp,编码215个氨基酸,分子量约为24.57 kDa,理论等电点为6.33.系统发育分析表明这两个基因与桔全爪螨Panonychus citri Delta家族的GST基因的氨基酸序列一致性为93%.实时荧光定量PCR结果表明,TuGSTd1和TuGSTd2在二斑叶螨抗螺螨酯品系中的相对表达量分别为敏感品系的5.60和3.75倍.[结论]GST基因在二斑叶螨抗螺螨酯品系中的相对表达量均显著高于敏感品系,据此推测GST基因的过量表达可能与其对螺螨酯的抗性形成有关.

作者:吕娟娟;王进军;张寿芳;沈慧敏

来源:昆虫学报 2013 年 56卷 4期

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吕娟娟;王进军;张寿芳;沈慧敏
来源:
昆虫学报 2013 年 56卷 4期
标签:
二斑叶螨 抗螺螨酯品系 GST 基因克隆 表达量 荧光定量PCR
[目的]揭示二斑叶螨Tetranychus urticae对螺螨酯的分子抗性机理.[方法]利用RT-PCR克隆了二斑叶螨的谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因cDNA全长序列,采用生物信息学软件分析了克隆基因的编码蛋白特性;利用实时荧光定量PCR方法分析GST基因在二斑叶螨的螺螨酯抗性与敏感品系中的表达差异.[结果]克隆获得的谷胱甘肽-S-转移酶2个基因分别被命名为TuGSTd1和TuGSTd2(GenBank登录号分别为:KC445659和KC445660).序列分析发现,TuGSTd1的开放阅读框长度为648 bp,编码215个氨基酸,分子量约为24.47 kDa,理论等电点为5.49; TuGSTd2的开放阅读框为648 bp,编码215个氨基酸,分子量约为24.57 kDa,理论等电点为6.33.系统发育分析表明这两个基因与桔全爪螨Panonychus citri Delta家族的GST基因的氨基酸序列一致性为93%.实时荧光定量PCR结果表明,TuGSTd1和TuGSTd2在二斑叶螨抗螺螨酯品系中的相对表达量分别为敏感品系的5.60和3.75倍.[结论]GST基因在二斑叶螨抗螺螨酯品系中的相对表达量均显著高于敏感品系,据此推测GST基因的过量表达可能与其对螺螨酯的抗性形成有关.

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