目的 探讨miR-218-5p和LAYN在结肠癌中的表达水平以及二者的调控关系对结肠癌进展的影响.方法 采用RT-qPCR对结肠癌组织、癌旁组织以及细胞系中的miR-218-5p的表达进行检测.采用Western blot对结肠癌组织、癌旁组织和细胞系中的LAYN蛋白表达水平进行检测.采用原位杂交(in situ hybridizsation,ISH)实验对结肠癌组织和癌旁组织中的 miR-218-5p的表达进行检测.采用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)实验对结肠癌组织和癌旁组织中的LAYN蛋白分布和表达进行检测.采用双荧光素酶实验对miR-218-5p与LAYN的 3'-非翻译区(rn-translation region,UTR)的结合关系进行检测.采用CCK-8对细胞的增殖进行检测;采用Transwell法对细胞的侵袭能力进行检测;采用流式细胞术对细胞的凋亡水平进行检测;采用Western blot对细胞中cleaved Caspase3 表达水平进行检测.结果 在结肠癌组织和结肠癌细胞系中,miR-218-5p表达降低并且HT-29 细胞中表达最低(P<0.0001),LAYN表达升高并且HT-29 细胞中表达最高(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验结合Western blot实验表明miR-218-5p可以结合在LAYN的 3′UTR区域并抑制其蛋白表达(P<0.01).在细胞实验中,过表达miR-218-5p抑制细胞增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.001)并增加凋亡(P<0.01)和cleaved Casp

作者：蔡冰；张伟；刘静；刘屹

来源：昆明医科大学学报 2023 年 44卷 12期