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目的 观察微小RNA-21(miRNA-21)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞增殖的影响,并探讨其可能机制.方法 取大鼠心肌细胞H9C2,用LPS 10 μg/mL处理0、6、12 h,RT-PCR法检测细胞miRNA-21表达.将对数生长期的H9C2细胞随机分为4组,A组不处理,B组用LPS 10 μg/mL处理12 h;C、D组分别转染对照质粒(NC-miRNA片段)、miRNA-21抑制质粒(miRNA-21 antagomiR),培养48 h后再用LPS 10 μg/mL处理12 h.采用CCK-8法检测各组H9C2细胞增殖的OD值,Western blot法检测H9C2细胞中Bax、Bcl-2蛋白,分光光度法检测H9C2细胞中Caspase-3活性.结果 LPS处理0、6、12 h时,H9C2细胞miRNA-21相对表达量分别为1.05 ±0.03、12.95±0.08、19.62±0.12;与0h时比较,6、12 h时H9C2细胞miRNA-21相对表达量升高(P均<0.01).A、B、C、D组H9C2细胞增殖的OD值分别为1.08±0.03、0.71 ±0.03、0.70±0.01、0.85±0.02,A组>D组>B、C组,P均<0.01.与A组比较,B、C、D组H9C2细胞中Bax相对表达量增加、Bcl-2相对表达量降低(P均<0.01);与B、C组比较,D组H9C2细胞中Bax相对表达量减少、Bcl-2相对表达量增加(P均<0.01).B、C、D组H9C2细胞Caspase-3活性分别为1.13 ±0.08、1.10±0.14、0.57±0.06,D组H9C2细胞Caspase-3活性低于B、C组,P均<0.01.结论 LPS可致

作者:王圆;黄燕;杨丹英;姜虹

来源:山东医药 2016 年 56卷 38期

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作者:
王圆;黄燕;杨丹英;姜虹
来源:
山东医药 2016 年 56卷 38期
标签:
微小核糖核酸21 脂多糖 心肌细胞 细胞增殖 凋亡相关蛋白 脓毒血症 大鼠
目的 观察微小RNA-21(miRNA-21)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞增殖的影响,并探讨其可能机制.方法 取大鼠心肌细胞H9C2,用LPS 10 μg/mL处理0、6、12 h,RT-PCR法检测细胞miRNA-21表达.将对数生长期的H9C2细胞随机分为4组,A组不处理,B组用LPS 10 μg/mL处理12 h;C、D组分别转染对照质粒(NC-miRNA片段)、miRNA-21抑制质粒(miRNA-21 antagomiR),培养48 h后再用LPS 10 μg/mL处理12 h.采用CCK-8法检测各组H9C2细胞增殖的OD值,Western blot法检测H9C2细胞中Bax、Bcl-2蛋白,分光光度法检测H9C2细胞中Caspase-3活性.结果 LPS处理0、6、12 h时,H9C2细胞miRNA-21相对表达量分别为1.05 ±0.03、12.95±0.08、19.62±0.12;与0h时比较,6、12 h时H9C2细胞miRNA-21相对表达量升高(P均<0.01).A、B、C、D组H9C2细胞增殖的OD值分别为1.08±0.03、0.71 ±0.03、0.70±0.01、0.85±0.02,A组>D组>B、C组,P均<0.01.与A组比较,B、C、D组H9C2细胞中Bax相对表达量增加、Bcl-2相对表达量降低(P均<0.01);与B、C组比较,D组H9C2细胞中Bax相对表达量减少、Bcl-2相对表达量增加(P均<0.01).B、C、D组H9C2细胞Caspase-3活性分别为1.13 ±0.08、1.10±0.14、0.57±0.06,D组H9C2细胞Caspase-3活性低于B、C组,P均<0.01.结论 LPS可致

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