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目的对副溶血弧菌TDH基因进行克隆、鉴定与表达,为制备单抗、诊断试剂及进一步深入研究TDH的功能奠定基础.方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增TDH基因将扩增的产物连接于测序载体pGEM-T上,经测序反应确定无误后,再将PCR产物与原核表达载体pQE100构建表达TDH的重组质粒,将重组质粒先转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,经双酶切鉴定后,再转化入表达宿主大肠杆菌BL21菌株内,对转化菌株进行诱导后,破菌,进行SDS-PAGE电泳.结果 电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白,其表达的蛋白质相对分子质量为24 000.结论 TDH基因成功克隆到表达质粒内并表达,为制备单抗、诊断试剂与其致病机制研究奠定了基础.
作者：季慧峰；倪培华；吴洁敏
来源：检验医学 2004 年 19卷 6期
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