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目的构成内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial nitric oxide synthase traffic inducer,NOSTRIN)基因的原核表达重组体,并进行初步表达.方法从人胎盘组织中提取总RNA,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出NOSTRIN基因;将NOSTRIN基因克隆入pGEM-T载体中,经DNA测序确认后,构建原核表达重组体pRSET-NOS,在工程菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果所获得的NOSTRIN基因测序正确,并表达重组蛋白,经SDS-PAGE分析,相对分子量为58KD.结论构建的原核表达重组体pRSET-NOS能高效表达重组NOSTRIN蛋白.

作者:相文佩;陈汉平

来源:中国优生与遗传杂志 2005 年 13卷 1期

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作者:
相文佩;陈汉平
来源:
中国优生与遗传杂志 2005 年 13卷 1期
标签:
NOSTRIN 原核表达载体 克隆表达
目的构成内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial nitric oxide synthase traffic inducer,NOSTRIN)基因的原核表达重组体,并进行初步表达.方法从人胎盘组织中提取总RNA,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出NOSTRIN基因;将NOSTRIN基因克隆入pGEM-T载体中,经DNA测序确认后,构建原核表达重组体pRSET-NOS,在工程菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果所获得的NOSTRIN基因测序正确,并表达重组蛋白,经SDS-PAGE分析,相对分子量为58KD.结论构建的原核表达重组体pRSET-NOS能高效表达重组NOSTRIN蛋白.

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