目的 探讨dead box 1(DDX1)基因对神经母细胞瘤(NB)细胞侵袭、迁移及耐药能力的影响.方法 根据病毒滴度在2孔细胞中分别加入适宜量的目的病毒(Lenti-DDX1-MIR病毒液,滴度1012 TU/L)和阴性对照病毒(Lenti-EGFP病毒液,滴度3×1011 TU/L)[感染复数(MOI)=10].将生长状态良好、处于对数生长期的空细胞[SK-N-BE(2)/blank]、阴性对照组细胞[SK-N-BE(2)/shV]和干扰DDX1组[SK-N-BE(2)/shDDX1]细胞进行培养.用Transwell法检测细胞侵袭能力,并用结晶紫对细胞进行染色,每个小室选取5个视野计数,取平均值计算细胞的侵袭率.用Transwell法检测细胞迁移能力,并用结晶紫对细胞进行染色,用酶标仪检测570 nm处的吸光度值,然后计算细胞迁移能力.称取50 mg顺铂,用5 mL二甲基亚砜(DMSO)溶齐溶解配制成质量浓度为10 g/L的母液备用;称取50 mg多柔比星,用PBS溶剂溶解配制成质量浓度为1 g/L的母液备用.将药物加入细胞培养板,达到终浓度,其中多柔比星终质量浓度为1.0 mg/L,顺铂终质量浓度为2.5 mg/L,药物处理24h,然后拍照记录.CCK-8检测细胞对多柔比星和顺铂的敏感性变化.结果 Transwell实验结果显示,SK-N-BE(2)/shDDX1细胞侵袭的细胞量只有SK-N-BE(2)/blank及SK-N-BE(2)/shV细胞的60％;结晶紫染色显示,SK-N-BE (2)/shDDX1细胞的侵袭

作者：李建华；刘玉峰；王家勤；郭学鹏

来源：中华实用儿科临床杂志 2016 年 31卷 8期