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目的:观察不同条件下人肺微血管内皮细胞(HPMEC)中核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达变化,探讨Nrf2抑制铁死亡在减轻高氧肺损伤(HLI)过程中的作用。方法:采用HPMEC建立高氧暴露模型。将HPMEC按照简单随机分组分为4组:对照组、高氧组(氧体积分数950 mL/L)、铁死亡抑制剂组(氧体积分数950 mL/L,10 μmol/L Ferrostatin)及Nrf2抑制剂组(氧体积分数950 mL/L,10 μmol/L ML385),分别在24 h、48 h使用细胞活性检测试剂盒测定细胞活性,荧光活性氧(ROS)试剂盒检测各组细胞内ROS水平,应用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测Nrf2、GPX4的mRNA及其蛋白表达水平。2组间比较采用两样本 t检验;多组间比较采用单因素方差分析。 结果:1.与对照组相比,高氧组HPMEC细胞活性降低,细胞内ROS含量增加,24 h及48 h GPX4 mRNA(24 h:0.750±0.010比1.010±0.160,48 h:0.690±0.050比1.000±0.070)和蛋白表达(24 h:0.160±0.010比0.290±0.010,48 h:0.190±0.010比0.250±0.010)均下降,Nrf2 mRNA(24 h:1.740±0.050比1.000±0.050,48 h:2.130±0.020比1.000±0.030)和蛋白表达(24 h:0.840±0.010比0.480±0.010,48 h:0.840±0.010比0.550±0.030)均增加,

作者:殷晓桐;罗好;施佳;楚晓云;蔡成

来源:中华实用儿科临床杂志 2023 年 38卷 7期

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作者:
殷晓桐;罗好;施佳;楚晓云;蔡成
来源:
中华实用儿科临床杂志 2023 年 38卷 7期
标签:
铁死亡 高氧肺损伤 人肺微血管内皮细胞 谷胱甘肽过氧化物酶4 核因子红细胞系2相关因子2 Ferroptosis Hyperoxia lung injury Human pulmonary microvascular endothelial cells Glutathione peroxidase 4 Nuclear factor erythroid 2 related factor 2
目的:观察不同条件下人肺微血管内皮细胞(HPMEC)中核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达变化,探讨Nrf2抑制铁死亡在减轻高氧肺损伤(HLI)过程中的作用。方法:采用HPMEC建立高氧暴露模型。将HPMEC按照简单随机分组分为4组:对照组、高氧组(氧体积分数950 mL/L)、铁死亡抑制剂组(氧体积分数950 mL/L,10 μmol/L Ferrostatin)及Nrf2抑制剂组(氧体积分数950 mL/L,10 μmol/L ML385),分别在24 h、48 h使用细胞活性检测试剂盒测定细胞活性,荧光活性氧(ROS)试剂盒检测各组细胞内ROS水平,应用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测Nrf2、GPX4的mRNA及其蛋白表达水平。2组间比较采用两样本 t检验;多组间比较采用单因素方差分析。 结果:1.与对照组相比,高氧组HPMEC细胞活性降低,细胞内ROS含量增加,24 h及48 h GPX4 mRNA(24 h:0.750±0.010比1.010±0.160,48 h:0.690±0.050比1.000±0.070)和蛋白表达(24 h:0.160±0.010比0.290±0.010,48 h:0.190±0.010比0.250±0.010)均下降,Nrf2 mRNA(24 h:1.740±0.050比1.000±0.050,48 h:2.130±0.020比1.000±0.030)和蛋白表达(24 h:0.840±0.010比0.480±0.010,48 h:0.840±0.010比0.550±0.030)均增加,

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