目的 探讨不同浓度葡萄糖对小鼠海马神经元细胞系HT-22细胞凋亡的作用及机制.方法 体外培养小鼠海马神经元HT-22细胞,使用不同浓度的高糖培养液(25、35、45、55、65、75 mmol/L)分别作用细胞24、48、72 h,以25 mmol/L糖浓度为对照组,其余组为实验组.采用CCK-8法检测各组细胞活力变化,筛选出最佳作用时间.HT-22细胞经不同浓度葡萄糖作用48 h后,微板法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率;光学显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax蛋白表达量的变化.结果 CCK-8结果显示,高糖可抑制HT-22细胞的活力,其抑制作用具有剂量和时间依赖性.高糖作用时间48 h时,细胞活力≥80％,可满足后续实验要求.随着葡萄糖浓度的增高,出现细胞数目减少,胞体变大,部分胞核溶解,突触断裂等改变,并且LDH释放率及凋亡率也明显增高(P<0.05),Western blot结果显示凋亡蛋白Bcl-2表达下降(P<0.05),Bax表达增高(P<0.05).结论 高糖能显著抑制HT-22细胞生长和活力,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与Bcl-2、Bax表达有关.
作者：朱金凤；许永劼；朱丽英；代龙光；钱雯；张競之；许雯；李兴；潘卫
来源：天津医药 2019 年 47卷 11期
