目的 使用Aβ,-42诱导HT22细胞建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)细胞模型,并探讨该模型中Aβ导致的神经损伤及细胞凋亡的靶向信号通路.方法 分别使用不同浓度的Aβ,-42(0,0.625,1.25,2.5,5,10,20,40 μmol/L)干预HT22细胞,确定建立AD细胞模型的最适浓度;随后在最适浓度干预后6,12,24,48 h观察细胞形态,检测细胞存活率,确定建立AD细胞模型的最适时间.将细胞分为AD组(20 μmol/L Aβ1-42+PBS)和NC组(PBS),生长对数期的HT22细胞分别干预24 h,进行后续实验.Western blot检测细胞凋亡指标(cleaved-Caspase-3)、神经营养因子(NRN1)、神经突触指标(SYP、MAP-2)的表达情况;免疫荧光检测MAP-2的表达及分布情况.生物信息学的方法预测AD相关信号通路,并通过Western blot验证ERK信号通路的磷酸化水平.结果 Aβ1-42诱导HT22细胞建立AD细胞模型的最适浓度为20 μmol/L,最适时间为24h.与NC组相比,AD组cleaved-Caspase-3表达升高(P＜0.01),NRN1表达降低(P＜0.000 1),SYP、MAP-2表达降低(P＜0.01).生物信息学的分析显示,ERK1(MAPK3)与APP和CASP9基因表达呈正相关(r=0.634,P＜0.01;r=0.513,P＜0.05).Western blot显示,与NC组相比,AD组ERK磷酸化水平较高(P＜0.01).结论 Aβ1-42诱导HT22细胞建立的AD细胞模型中,引起

作者：王昱驰；马宏玉；王振宇；张少轩；张育泰；高宇航；孙嘉伟

来源：山西医科大学学报 2024 年 55卷 2期