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目的 研究 MLAA-22 基因的表达下调对 U937 细胞增殖及分化的影响.方法 采用规律成簇间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关核酸酶 9(Cas9)系统下调 U937 细胞 MLAA-22 基因的表达;CruiserTM酶切法检测单链引导 RNA(single guide RNA,sgRNA)的活性;基因突变区PCR产物的 TA 克隆及测序法检测 MLAA-22 基因的突变率;细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖;流式细胞仪检测 CD11b 的表达.结果 CruiserTM酶切结果显示:所采用的CRISPR/Cas9 系统的 sgRNA序列能够高效地识别基因编辑靶点;TA克隆及测序结果显示:MLAA-22 基因的突变率为 61.3

作者:崔鹤;张王刚

来源:西安交通大学学报(医学版) 2018 年 39卷 4期

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作者:
崔鹤;张王刚
来源:
西安交通大学学报(医学版) 2018 年 39卷 4期
标签:
MLAA-22基因 细胞增殖 细胞分化 急性单核细胞白血病 MLAA-22 gene cell proliferation cell differentiation acute monocytic leukemia
目的 研究 MLAA-22 基因的表达下调对 U937 细胞增殖及分化的影响.方法 采用规律成簇间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关核酸酶 9(Cas9)系统下调 U937 细胞 MLAA-22 基因的表达;CruiserTM酶切法检测单链引导 RNA(single guide RNA,sgRNA)的活性;基因突变区PCR产物的 TA 克隆及测序法检测 MLAA-22 基因的突变率;细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖;流式细胞仪检测 CD11b 的表达.结果 CruiserTM酶切结果显示:所采用的CRISPR/Cas9 系统的 sgRNA序列能够高效地识别基因编辑靶点;TA克隆及测序结果显示:MLAA-22 基因的突变率为 61.3

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