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作者：

张玉娟；李华文；常国强；张洪菊；王建；蔺亚妮；周家喜；李庆华；庞天翔

来源：

中国实验血液学杂志 2013 年 21卷 4期

标签：

DOT1L基因急性单核细胞白血病 THP-1细胞 DOT1L gene acute monocytic leukemia THP-1 cell

本研究旨在探讨DOT1L基因对人白血病THP-1细胞增殖的影响.针对DOT1L mRNA的第732-752靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性干扰载体,制备慢病毒并感染THP-1细胞,用强力霉素(Dox)诱导干扰载体表达;应用RT-PCR的方法验证干扰效率;采用改良MTT法检测干扰DOT1L基因后对THP-1细胞增殖能力的影响;用细胞集落形成实验观察干扰后细胞集落形成的能力;用流式细胞术分析细胞周期的变化.结果表明:THP-1细胞干扰后DOT1L基因的表达显著降低;DOT1L基因的表达下调抑制了细胞的增殖能力、集落形成能力并将细胞周期阻滞在G0/G1期.结论:利用shRNA靶向干扰DOT1L基因的表达,可以有效抑制人急性单核细胞白血病细胞THP-1的增殖.

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