目的 探究miR-181b-5p通过靶向结合配对盒基因9(PAX9)对急性髓细胞性白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响.方法 分别用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库和肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析AML患者中PAX9的表达水平和预后的关系.在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染空载体(Vector组)或PAX9(PAX9组),CCK-8法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot法检测细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)和细胞周期蛋白B1(CCNB1)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的表达.生物信息学分析预测PAX9靶作用的微小RNA(miRNA)、荧光素酶报告系统验证其靶向作用,实时定量PCR检测PAX9 mRNA水平,Western blot法检测PAX9蛋白表达.在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染 miR-NC(miR-NC 组)或 miR-181b-5p(miR-181b-5p 组),在 miR-181b-5p 组细胞中进一步转染 PAX9(miR-181b-5p 联合PAX9组),采用前述方法分别检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡.结果 GEPIA和TCGA数据库显示AML患者PAX9呈低表达趋势并与患者不良预后相关.在Kasumi-1、AML5细胞中,与Vector组相比,PAX9组细胞增殖活力、S期细胞百分比、CDK2、CCNB1和Bcl2蛋白表达降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、BAX蛋白表达升高.双荧光素酶报告基因验证PAX9是miR-
作者:李斌;陶千山;胡雪莹;李坦;鲍扬漪
来源:细胞与分子免疫学杂志 2023 年 39卷 12期