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目的 构建结核杆菌热休克蛋白65KD (HSP65)基因真核表达载体pIHSP65,并在Hela细胞中表达.方法 从结核杆菌H37Rv株的基因组中扩增HSP65 基因,克隆到双顺反子真核表达载体pIRES的多克隆位点A中,构建pIHSP65真核表达载体,采用阳离子多聚体将其转染到Hela细胞中,用免疫组化染色法检测HSP65基因的表达.结果 所克隆的HSP65基因片段经测序完全正确.重组质粒转染Hela细胞后,用免疫组化染色法检测有HSP65蛋白的表达.结论 成功构建了结核杆菌pIHSP65真核表达载体,并在Hela细胞中有效表达,为构建双抗原双顺反子真核表达质粒,以及在整体动物水平的实验研究奠定了基础.
作者：李岩；邓军霞；管大伟
来源：新乡医学院学报 2007 年 24卷 1期
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