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目的：探寻减数分裂关键重组蛋白MLH1在精子发生中的结合蛋白。方法以MLH1为诱饵，通过酵母双杂交系统，在小鼠睾丸组织的cDNA文库中进行筛选，寻找MLH1的相互作用蛋白并通过GST pull-down和免疫共沉淀的方法进行验证。结果通过酵母双杂交的筛选，在小鼠睾丸中经四缺板筛出蛋白29个，包括已知的MLH3和PSM2等。通过GST Pull-down和免疫共沉淀验证了其中一个新的蛋白RHNO1与MLH1的结合。通过Real-time PCR检测发现RHNO1在睾丸中高表达，提示RHNO1在精子发生中具有重要功能。结论酵母双杂交系统是寻找结合蛋白的有力手段，发现了新的MLH1结合蛋白RHNO1,可能参与了减数分裂同源重组。
作者：殷毅；平萍
来源：中国男科学杂志 2016 年 30卷 1期
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