目的 建立检测重组结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Ag85b蛋白原液纯度的反向高效液相色谱法,并进行验证.方法 设计4因素3水平正交试验,将面积、拖尾因子、峰面积、峰面积RSD作为评价指标进行分析,摸索最适检测条件,并依据《中国药典》四部(2020版)9101药品质量标准分析方法验证指导原则进行专属性、线性范围、精密度、耐用性等验证.结果 当检测条件为有机相洗脱比例30％～95％、检测温度35 ℃、进样量3 μg、95％有机相洗脱时间15 min时,各评价指标结果均较好,在该检测条件下线性相关系数(R2)为0.998 5,线性范围为1.8～4.2 μg;重复性RSD为0.01％;中间精密度RSD为0.16％;在柱温与流速细微变动下均具有良好的耐用性.结论 建立了重组MTBAg85b蛋白原液纯度检测的反向高效液相色谱法,该方法专属性强,精密度、耐用性好,可用于重组MTBAg85b蛋白原液质量控制.
作者：金丽婷；黄岳；张素勤；肖文俊；朱克骏；张健；江秋虹
来源：中国生物制品学杂志 2024 年 37卷 1期
